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.1977年3月25日；252(6):1927-31.

大鼠肾磷酸依赖性谷氨酰胺酶的激活与二聚体形成的相关性

S戈弗雷, T库伦施密特, P柯特霍斯
  • PMID： 845154
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大鼠肾脏磷酸依赖性谷氨酰胺酶激活与二聚体形成的关系

S戈弗雷等。 生物化学杂志. .
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摘要

采用凝胶过滤和蔗糖梯度速度沉降法测定纯化的大鼠肾磷酸依赖性谷氨酰胺酶的分子量。纯化的谷氨酰胺酶在Tris或巴比妥缓冲液中的分子量为160000，在其活化剂Pi存在下形成分子量为332000的二聚体。通过测定不同浓度谷氨酰胺酶活化剂的沉降系数，研究活化与二聚体形成之间的相关性。Pi和磷酸核黄素的饱和曲线表明，随着这些活化剂浓度的增加，活化百分比和S20（w）增加之间存在良好的相关性。半最大饱和所需的浓度对于Pi为40至50mM，对于核黄素磷酸盐为10至15mM。活化和二聚体形成之间的相关性也被发现与其他活化剂在过饱和浓度下的相关性。此外，发现通过增加NaCl浓度，活化和二聚体的形成在类似程度上被逆转。最后，我们研究了Pi和NaCl对37度下谷氨酰胺酶活性稳定性的影响。Pi通过将失活t1/2从无Pi的12分钟增加到150 mM Pi的242来稳定谷氨酰胺酶的活性。在t1/2中产生大约一半最大变化的Pi浓度为50 mM，添加NaCl可逆转这种稳定性。这些结果支持了这样一种假设，即磷酸依赖性谷氨酰胺酶仅作为二聚体或更大的聚集体发挥作用。然而，我们不能排除这样的可能性，即Pi的结合足以改变单体构象以产生活化，并且这种新构象导致自结合。

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