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.1993年4月;193(2):717-26.
doi:10.1006/viro.1993.1180。

纽卡斯尔病病毒血凝素-神经氨酸酶蛋白的附着功能可以通过突变从促进融合中分离出来

附属公司

纽卡斯尔病病毒血凝素-神经氨酸酶蛋白的附着功能可以通过突变从促进融合中分离出来

T谢尔盖等。 病毒学. 1993年4月.

摘要

利用Cos-7细胞和基于SV40的载体,建立了由新城疫病毒血凝素-神经氨酸酶(HN)和融合糖蛋白指导的融合定量分析。这些检测的数据表明,HN蛋白和融合蛋白DNA共转染后,合胞体的大小在背景水平上逐渐增加,而仅转染HN蛋白或F蛋白DNA不会导致背景水平上的变化。利用免疫荧光技术,评估由糖蛋白引导的合胞体形成的效率。几乎所有仅表达融合蛋白或仅表达HN蛋白的细胞都作为单核细胞存在。然而,所有与这两个基因共存的细胞都存在于4到50个细胞核的合胞体中。利用这些分析,定量了HN蛋白两个缺失突变体的融合促进活性。一个突变删除了氨基酸4到26,有效地去除了蛋白质的细胞质结构域。这种突变蛋白是在细胞表面发现的,尽管数量非常少。突变蛋白可以结合红细胞并促进融合,尽管形成的合胞体比野生型蛋白促进的合胞体小(4到9个细胞核)。第二个突变删除了9个氨基酸(91-99),定位于外结构域跨膜区域的37个氨基酸。在细胞表面检测到这种突变,其水平为野生型的33%,并保持了接近正常的结合红细胞的能力。然而,这种突变完全消除了HN蛋白的融合促进活性。这种突变有效地将HN蛋白的附着功能与融合促进分离。

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