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1993年7月25日;268(21):15812-22.

新型蛋白激酶C荧光探针的合成、表征及应用

附属公司
  • PMID: 8340406
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新型蛋白激酶C荧光探针的合成、表征及应用

C S陈等。 生物化学杂志
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摘要

合成了蛋白激酶C(PKC)的双吲哚甲酰亚胺抑制剂的荧光衍生物,并测试了它们作为PKC荧光细胞学染色剂的抑制效力、特异性和有用性。一些荧光双吲哚甲酰胺衍生物(fim-1、fim-2和rim-1)用作ATP-竞争性催化位点抑制剂,并保留了母体化合物的大部分效力和特异性。R6-C1和PKCβ1过度表达的R6-PKC3细胞系用于检测fim-1和rim-1作为PKC细胞学染色剂。比较显示,R6-PKC3细胞比R6-C1细胞染色更明亮。当R6-PKC3细胞被佛波酯佛波醇12-肉豆蔻酸13-醋酸盐(PMA)处理30分钟时,fim-1或抗PKCβ1染色显示PKC显著移位到细胞外周。当R6-PKC3细胞暴露于PMA中24小时后,PKC表达下调,细胞质染色显著减少。用PKCβ1特异性抗体和fim-1获得的染色模式非常相似,但线粒体染色除外,线粒体染色仅在fim-1中可见。线粒体染色的进一步检查表明,当细胞被PMA处理时,线粒体从丝状转变为点状,并围绕细胞核聚集。当PKC下调时,这种点状形态、核周聚集和fim-1染色持续存在。总之,这些结果表明fim-1和rim-1可以作为PKC的有用荧光探针。线粒体染色可能是由于PKC亚型抵抗下调。

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