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比较研究
.1994年6月3日;269(22):15683-8.

两种新型ADP-核糖基化因子样蛋白的克隆及其在3T3-L1细胞中的差异表达

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  • PMID: 8195219
免费文章
比较研究

两种新型ADP-核糖基化因子样蛋白的克隆及其在3T3-L1细胞中的差异表达

A Schurmann先生等。 生物化学杂志. .
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摘要

采用基于聚合酶链反应的克隆方法,鉴定小鼠3T3-L1细胞中的ADP-核糖基化因子(ARF),并研究其在细胞分化为脂肪细胞样表型前后的表达。用简并引物扩增ARF效应域的部分序列并克隆。其中五个序列被鉴定为已知人类ADP-核糖基化因子(ARF 1、2、4、5和6)的小鼠同源物。此外,还发现了两种先前未知的亚型的部分序列,并从大鼠脂肪细胞库中分离出完整的cDNA克隆并测序。这两个序列在位置2都有一个假定的肉豆蔻酰化位点,已知的一致序列可能参与GTP结合和水解,并且在C末端缺乏半胱氨酸残基。它们的氨基酸序列与人类ARF 1的同源性分别为56%和41%。根据与已知ARF亚型的比较,第一个克隆似乎代表果蝇已知序列的哺乳动物同源物(dARL1,79%同源性),因此被命名为rARL1。第二个克隆与已知的ARF样蛋白都不相似,被命名为rARL4。ARL4的mRNA在成纤维细胞中未检测到,但在脂肪细胞样表型中丰富,其表达始于分化第6天。相反,ARF 1、2和5未因3T3-L1细胞的分化而改变;分化后ARF6、ARL1和ARF4的mRNA水平降低。提示ARL4的功能与3T3-L1细胞的脂肪细胞样表型有关。

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