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.1994年5月1日;200(2):470-83.
doi:10.1006/viro.1994.1210。

单个半胱氨酸残基在新城疫病毒成熟抗原HN蛋白形成中的作用

附属公司

单个半胱氨酸残基在新城疫病毒成熟抗原HN蛋白形成中的作用

L W麦金尼斯等。 病毒学. .

摘要

新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸酶(HN)糖蛋白的氨基酸序列有14个半胱氨酸残基,其中两个残基在不同NDV株的HN蛋白序列中存在差异,而其余的都是绝对保守的。每个残基在HN蛋白成熟寡聚结构形成中的作用通过Western分析鉴定每个半胱氨酸残基突变的蛋白质、用构象敏感抗体进行免疫沉淀、免疫荧光和蔗糖梯度沉淀来评估。第一个半胱氨酸(氨基酸6)或第二个半胱酶(氨基酸123)突变的蛋白质(非半胱氨酸残基)形成抗原成熟的寡聚体,像野生型一样运输到细胞表面。然而,半胱氨酸2突变的蛋白质没有形成共价连接的低聚物,这表明正是这个残基负责成熟低聚物中的分子间二硫键。半胱氨酸3(氨基酸172)或半胱氨酸5(氨基酸196)突变的蛋白质形成了除一个位点23外的所有抗原位点的蛋白质。这些突变蛋白形成二硫键二聚体,并被有效地运输到细胞表面。然而,它们并不像野生型蛋白质那样在梯度上沉积。它们还存在与野生型蛋白质相关的生物活性缺陷。半胱氨酸4(氨基酸186)、6(氨基酸238)、7(氨基酸247)、8(氨基酸251)、13(氨基酸531)或14(氨基酸542)突变的蛋白质不含成熟抗原位点,但形成非共价连接的低聚物。半胱氨酸9(氨基酸344)、10(氨基酸455)、11(氨基酸461)或12(氨基酸465)突变的蛋白质形成具有抗原位点4但没有其他成熟抗原位点的蛋白质。这些突变蛋白也形成了非共价连接的低聚物。这些结果表明,不同半胱氨酸残基的突变在不同阶段阻碍了HN蛋白的成熟。

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