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.1994年2月;15(2):162-74.
doi:10.1016/0143-4160(94)90055-8。

Ca(2+)动员激动剂增强人结肠细胞HT29-cl.19A中forskolin和VIP刺激的cAMP生成:[Ca2+]i和蛋白激酶C的作用

附属机构

Ca(2+)动员激动剂增强人结肠细胞HT29-cl.19A中forskolin和VIP刺激的cAMP生成:[Ca2+]i和蛋白激酶C的作用

G沃赫斯特等人。 细胞钙. 1994年2月.

摘要

本研究检测了Ca(2+)信号通路在调节人类结肠腺癌细胞系HT29-cl.19A中激动剂刺激的cAMP反应中的作用。毒蕈碱激动剂卡巴胆碱(CCh)刺激HT29-cl.19A细胞中细胞IP3和胞浆Ca2+,[Ca2+]i的快速增加。伴随着基础cAMP水平的少量但显著增加,以及forskolin-(FSK)和VIP刺激的cAMP生成显著增强(3-4倍)。另外两种钙动员激动剂,神经降压素和ATP也观察到类似的效果。CCh未能诱导破细胞制剂中腺苷酸环化酶的增强,表明这是一种间接作用。钙离子载体、离子霉素和thapsigargin可以模拟增强作用,并通过消耗细胞内Ca2+储存来抑制70-90%,这表明[Ca2+]i的升高是这种反应的主要介质。相反,将[Ca2+]i水平增加到>500 nM会显著抑制FSK刺激的cAMP生成。同时评估蛋白激酶C(PKC)的参与情况。PKC激活剂佛波醇12,13二丁酸(PDB)和1-油酰基-2-乙酰甘油(OAG)使FSK刺激的cAMP产生增强50-70%,尽管PDB显著抑制了cAMP对受体介导的cAMP激动剂VIP的反应。无活性的佛波酯、4α-佛波酯和12,13双癸酸酯(PDD)均不能引起上述效应。PKC抑制剂staurosporine和H7将CCh诱导的FSK刺激cAMP生成的增强作用降低了约25%。总之,这些结果表明,刺激HT29-cl.19A集落细胞中的磷脂酰肌醇酶C途径可诱导腺苷酸环化酶系统的“敏化”,导致激动剂刺激的cAMP生成显著增加。[Ca2+]i的增加似乎是增强的重要介质,尽管PKC的激活也可能发挥重要作用。

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