Evidence for discrete diacylglycerol and phorbol ester activator sites on protein kinase C. Differences in effects of 1-alkanol inhibition, activation by phosphatidylethanolamine and calcium chelation

.1994年6月24日；269(25):17160-5.

蛋白质激酶C上离散的二酰甘油和佛波酯活化位点的证据。1-烷醇抑制、磷脂酰乙醇胺活化和钙螯合作用的差异

S J斯莱特¹, M B凯利, F J塔德奥, E鲁宾, C D树桩

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PMID： 8006023

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蛋白质激酶C上离散的二酰甘油和佛波酯活化位点的证据。1-烷醇抑制、磷脂酰乙醇胺活化和钙螯合作用的差异

S J斯莱特等人。生物化学杂志. 1994.

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.1994年6月24日；269(25):17160-5.

作者

S J斯莱特¹, M B凯利, F J塔德奥, E鲁宾, C D树桩

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¹宾夕法尼亚州费城托马斯·杰斐逊大学病理学和细胞生物学系，19107年。

PMID： 8006023

摘要

蛋白质激酶C（PKC）活性的刺激是通过二酰甘油在体内实现的，但也可以通过促肿瘤的佛波酯获得。有证据表明，这两类激活剂可能在酶的不同区域相互作用。用1,2-二油酰基甘油（DOG）和佛波酯4β-12-O-十四烷基佛波-13-乙酸酯（TPA）测定钙依赖性PKC亚型（PKC-I）制剂的活性。由此产生的PKC活性超过了单独使用任何一种激活剂所获得的活性，每种激活剂都处于最大激活浓度。纯化的PKC-α和-ε亚型也得到了类似的结果，表明加性效应不是由于位点位于不同的酶分子上。两个不同激活位点的支持来自于观察到，在PKC激活中，非活性佛波酯4α-TPA与TPA竞争，而不是与DOG竞争。在TPA和DOG激活的PKC之间观察到其他差异。发现1-丁醇抑制DOG-激活的PKC-I，而对TPA的刺激无影响。此外，磷脂酰乙醇胺包含在脂质囊泡中导致PKC-I活性增强，与TPA相比，DOG实现激活时PKC-I活性增强。此外，在钙螯合作用下，PKC的钙和DOG依赖性活性构象变化是完全可逆的，而TPA刺激的活性构象变化仅是部分可逆的。这些实验共同表明，二酰基甘油和佛波酯在PKC上的不同位置以不同亲和力结合，并诱导酶的不同活化构象形式。

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