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.1994年11月;68(11):7386-96.
doi:10.1128/JVI.68.11.7386-7396.1994。

水疱性口炎病毒基质蛋白的膜结合域与细胞病变

附属公司

水疱性口炎病毒基质蛋白的膜结合域与细胞病变

Z Ye公司等人。 J维罗尔. 1994年11月.

摘要

通过比较野生型(wt)病毒M蛋白和温敏型(ts)病毒M蛋白质的细胞分布,研究了水疱性口炎病毒(VSV)基质(M)蛋白的膜结合亲和力以及通过间接荧光抗体染色和分离感染或质粒转染的CV1细胞来探测缺失突变体。M基因突变体tsO23引起在允许温度下感染的细胞的细胞病变变圆,但不引起在非允许温度下感染的细胞的细胞病变变圆;wt-VSV也会导致圆整,这阻碍了通过荧光抗体染色研究M蛋白分布。在非允许温度下,感染tsO23的细胞的质膜中几乎没有检测到M蛋白,而在允许温度下约有20%的M蛋白与感染tsO2的细胞的膜部分共定位。用表达完整的229-氨基酸wt M蛋白(M1-229)的质粒转染的细胞表现出细胞病变细胞圆形和肌动蛋白丝溶解,而当用表达M蛋白的质粒转导时,细胞保持正常的多边形形态和肌动素丝,该质粒被截断为前74个N-末端氨基酸(M1-74)或删除前50个氨基酸(M51-229)或氨基酸1至50和75至106(M51-74/107-229)。根据荧光抗体染色和细胞分级测定,截短蛋白M1-74和M51-229在转染细胞的质膜和胞浆中很容易检测到,质粒表达的完整wt M蛋白也是如此。然而,通过荧光抗体染色或细胞分级不能在质膜中检测到表达的双缺失蛋白M51-74/107-229,这表明存在跨越VSV M蛋白的氨基酸1至50和氨基酸75至106区域的两个膜结合位点。这些体内数据通过体外结合试验得到证实,在该试验中,完整的M蛋白及其缺失突变体在高或低离子强度的缓冲液中用合成膜以声波单层囊泡的形式重建。这些实验的结果似乎证实了VSV M蛋白上存在两个膜结合位点,一个通过静电力在高电荷NH2末端外围结合,另一个通过疏水性氨基酸的稳定结合膜整合,并通过氨基酸88和119之间的亲水图定位。

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引用人

工具书类

    1. 《维罗尔杂志》。1985年5月;54(2):598-607-公共医学
    1. 《维罗尔杂志》。1994年1月;68(1):441-7-公共医学
    1. 《维罗尔杂志》。1986年6月;58(3):860-8-公共医学
    1. 生物化学。1976年8月10日;15(16):3563-70-公共医学
    1. 《维罗尔杂志》。1977年5月;22(2):500-9-公共医学

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