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.1994年6月;74(6):1133-40.
doi:10.1161/01.res.74.6.1133。

一氧化氮合成抑制诱导的细胞内氧化应激增加内皮细胞与中性粒细胞的粘附

附属公司

一氧化氮合成抑制诱导的细胞内氧化应激增加内皮细胞与中性粒细胞的粘附

X F牛等。 循环研究. 1994年6月.

摘要

本研究的目的是确定内皮细胞中一氧化氮合成的长期抑制是否会增加这些细胞对中性粒细胞的表面粘附。人脐静脉内皮细胞(HUVECs)在48周的微孔板中生长汇合。HUVEC暴露于一氧化氮合成抑制剂NG-硝基-L-精氨酸甲酯(L-NAME)后1小时未引起中性粒细胞粘附,但4小时后粘附增加,呈剂量依赖性。L-精氨酸或一氧化氮供体阻止了粘附增加,但cGMP的类似物不能阻止粘附增加。针对β2-整合素CD18和内皮细胞粘附分子ICAM-1的单克隆抗体抑制了粘附增加。血小板活化因子(PAF)受体拮抗剂WEB 2086也能阻止L-NAME诱导的中性粒细胞粘附。细胞内氧自由基清除剂(二甲基亚砜、丁基羟基甲苯和α,α’-联吡啶)、铁螯合剂脱铁胺和线粒体抑制剂叠氮化物抑制L-NAME诱导的中性粒细胞粘附,而细胞外氧自由基清除剂(超氧化物歧化酶和过氧化氢酶)则无作用。HUVEC装载有2’,7’-二氯二氢荧光素二乙酸酯,并监测氧化为荧光二氯二氢荧光素(DCHF)。L-NAME处理的HUVEC在4小时的孵育过程中荧光增强,这一事件可被抗氧化剂和叠氮化物抑制。DCHF的细胞内氧化量约等于0.8μmol/L H2O2。这些数据表明,长时间抑制HUVEC中的一氧化氮合成会导致氧化剂和PAF相关的中性粒细胞在内皮细胞表面的粘附增加。

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