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.1995年2月14日;34(6):1902-11.
doi:10.1021/bi00006a011。

热对纯化人热休克因子的体外活化

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热对纯化人热休克因子的体外活化

J S拉尔森等。 生物化学. .

摘要

真核生物热休克蛋白(hsp)基因热诱导转录的一个主要调控步骤是热休克因子(HSF)的激活。在后生动物和波姆裂殖酵母中,HSF存在于非应激细胞中,但不能与其靶DNA序列元件热休克元件(HSE)结合。热诱导HSF的DNA结合活性是激活热休克基因所需的关键成分。非热休克人类细胞提取物中的非活性HSF可以在体外加热以激活HSF,这表明感温和激活HSF所需的因子是可溶因子[Larson,J.S.,Schuetz,T.J.,&Kingston,R.E.(1988)Nature 335,372-375]。我们利用纯化人HSF活性形式的能力进一步表征HSF的体外活化。在这里,我们开发了一种程序去激活HSF的DNA结合能力。当纯化和失活的HSF被加热时,HSF的DNA结合能力被激活。这种活化在43℃(热冲击温度)时最有效,但与原油系统中的活化相比,在37℃(非热冲击温度下)时观察到HSF的一些活化。我们发现纯化和失活的HSF在大小和形状上与天然非活性HSF相似。因此,在没有其他蛋白质的情况下,激活HSF的单体到三聚体转变可以以温度依赖的方式发生。HSF的这些生化特性可能有助于HSF对体内热反应的能力。

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