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.1995年4月28日;270(17):9991-10001.
doi:10.1074/jbc.270.17.9991。

NIH 3T3成纤维细胞中过表达的8种蛋白激酶C同工酶的免疫细胞化学定位。与微丝、高尔基体、内质网、核膜和细胞膜的同种异型特异性联系

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八种蛋白激酶C同工酶在NIH 3T3成纤维细胞中过度表达的免疫细胞化学定位。与微丝、高尔基体、内质网、核膜和细胞膜的异构体特异性结合

J A晚安等。 生物化学杂志. .
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摘要

我们已经使用免疫细胞化学分析来表征过表达这些不同PKC同工酶的NIH 3T3成纤维细胞中蛋白激酶C(PKC)-α、-βI、-βII、-γ、-δ、-ε、-zeta和-eta的亚细胞分布。免疫荧光研究和对单个亚型特异性抗体的免疫印迹显示,在活化之前,大多数PKC不是膜结合的,而是弥散分布在细胞质中。此外,部分PKC-delta和-eta呈膜结合,并集中在高尔基体中。用佛波酯12-O-十四烷酰基佛波-13-乙酸酯处理这些细胞,激活每个同工酶的激酶活性(PKC-zeta除外),导致同工酶特异性的细胞形态改变,以及不同PKC同工酶快速、选择性地重新分布到不同的亚细胞结构。12-O-十四烷基佛波-13-乙酸酯处理后几分钟内,PKC-α和-ε在细胞边缘聚集。此外,PKC-α在内质网中积累,PKC--βII与细胞骨架中富含肌动蛋白的微丝相关,PKC-γ在高尔基细胞器中积累,以及PKC-ε与核膜相关。我们的结果表明,每一个活化的PKC同工酶都与一个特定的细胞结构特异相关,可能包含该同工酶的底物。这些发现支持这样一种假设,即体内PKC底物特异性至少部分由每个PKC同工酶及其靶蛋白的受限亚细胞区域介导。

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