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.1994年4月29日；269(17):12645-53.

细胞内Ca2+储存的耗尽激活一氧化氮合酶生成cGMP并调节Ca2+内流

X Xu（X Xu） 1, R A星, G托托里奇, S穆阿勒姆
附属公司
  • PMID： 7513692
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细胞内Ca2+储存的耗竭激活一氧化氮合酶产生cGMP并调节Ca2+内流

X Xu（X Xu）等人。 生物化学杂志. .
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摘要

激动剂刺激的质膜Ca2+进入途径的激活机制尚不清楚。为了确定一氧化氮合酶（NOS）和cGMP在该途径调控中的作用，我们使用完整的和链球菌溶血素O（SLO）通透性胰腺腺泡，并测量了内部储存的Ca2+释放、NO代谢途径、cGMP的生成和Ca2+进入激活之间的关系。我们发现，激动剂或thapsigargin（Tg）激活的Ca2+进入受到NOS特异性抑制剂L-NA和鸟苷酸环化酶抑制剂LY83583的抑制。NO释放分子NO2-和硝普钠（SNP）以及Bt2cGMP逆转了通过抑制NOS抑制Ca2+进入的作用。抑制鸟苷酸环化酶对Ca2+进入的抑制作用被Bt2cGMP逆转，但NO释放剂没有逆转。使用L-NA处理的细胞和不同浓度的SNP表明，cGMP对Ca2+进入具有双重作用。将cGMP增加到对照组的10倍以上，激活Ca2+进入。cGMP的进一步增加比对照高出80倍，以浓度依赖的方式抑制Ca2+的进入。对完整细胞中细胞cGMP的测量表明，卡巴胆碱、Tg和NO2-将cGMP增加到类似的水平。L-NA和LY83586抑制了卡巴胆碱和Tg的作用，而NO2-的作用仅被LY8358抑制。SLO渗透性细胞显示出具有激动剂活性，因为激动剂诱导了1，4，5-三磷酸肌醇（IP3）池中的Ca2+释放，并激活了依赖于NO的cGMP生成。这些细胞被用来研究通过Ca2+和内部储存的Ca2+含量对NOS的调节。当内部储存物保持充满Ca2+时，将培养基[Ca2+]增加至2.5 microM只会适度增加NOS活性。相反，内部储存的Ca2+消耗显著增加了NOS活性，与培养基[Ca2+]无关。因此，NOS感应细胞溶质[Ca2+]i和内部储存的Ca2+负荷。我们认为，激活Ca2+进入涉及一种激动剂介导的Ca2+从内部存储释放，激活NOS细胞池生成cGMP，然后调节质膜中的Ca2+进入途径。这种机制可以解释Ca2+进入的电容性质。cGMP的双相效应为细胞提供了一种负反馈机制，在高细胞[Ca2+]i期抑制Ca2+进入。这可能导致Ca2+进入的振荡行为。

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