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.1993年12月;100(6):431-40.
doi:10.1007/BF00267823。

检测神经组织和培养细胞中各种类型和表达水平转录物的单一方案:使用地高辛标记的cRNA探针进行原位杂交

附属公司

检测神经组织和培养细胞中各种类型和表达水平转录物的单一方案:使用地高辛标记的cRNA探针进行原位杂交

N Schaeren-Weemers公司等。 组织化学. 1993年12月.

摘要

我们使用地高辛标记的cRNA探针为组织切片和培养细胞开发了一种简单的非放射性原位杂交程序。该协议可用于检测中枢神经系统中广泛表达水平的各种转录物。例如,小脑杂交信号的转录物估计在高丰度(MBP,髓磷脂碱性蛋白)、中等丰度(GluR1,AMPA/红藻氨酸敏感谷氨酸受体亚单位)和低丰度(肌醇多磷酸-5-磷酸酶)水平下表达。通过避免其他程序中常用的任何乙醇处理,显著提高了灵敏度和细胞分辨率。通过用核染料Hoechst 33258对组织进行复染,可以更容易地评估标记细胞相对于其环境的定位。本方案可与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的免疫细胞化学相结合。详细描述了该过程的所有步骤,包括cRNA探针的制备和标记、组织预处理、杂交和标记转录物的可视化。

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工具书类

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