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.1993年10月;214(1):11-6.
doi:10.1006/abio.1993.1449。

荧光法测定生物样品中的亚硝酸盐

附属公司

荧光法测定生物样品中的亚硝酸盐

T P米斯科等人。 Ana Biochem公司. 1993年10月.

摘要

一氧化氮合酶在越来越多的正常和病理生理过程中的作用的阐明,强调了其日益重要的作用。因此,检测亚硝酸盐/硝酸盐、精氨酸酶促转化为瓜氨酸和一氧化氮的氧化产物的技术应成为确定NO合成酶对这些过程的贡献的有用工具。基于亚硝酸盐与2,3-二氨基萘反应生成荧光产物1-(H)-萘三唑,我们开发了一种快速灵敏的荧光测定法来定量亚硝酸盐/硝酸盐。该试验可用于检测10 nM亚硝酸盐,使其灵敏度比著名的Griess试验高50-100倍。此外,该分析适用于96 well板格式,便于处理大量样品,包括来自细胞培养的条件培养基或纯化酶产生的亚硝酸盐。当结合过滤步骤(去除血红蛋白),然后通过硝酸还原酶将硝酸盐转化为亚硝酸盐时,也可以使用该分析监测血液中的亚硝酸盐/硝酸盐水平。因此,该荧光法将速度和灵敏度与大量样品的处理相结合,用于定量体内和体外来源产生的亚硝酸盐。

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