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.1978年12月10日;253(23):8570-7.

HeLa细胞S期DNA合成速率

  • PMID: 711767
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HeLa细胞S期DNA合成速率

J M柯林斯. 生物化学杂志. .
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摘要

高度同步化的HeLa细胞通过S期连续两次旅行,测定DNA合成速率。在从代谢块释放后的不同时间,用[3H]胸腺嘧啶核苷对细胞进行脉冲处理。整个细胞、纯化DNA和冈崎片段中的放射性量提供了DNA合成速率的指标。用二苯胺法测量每个细胞的平均DNA含量,用DNA:丙啶荧光法测定每个细胞的单个DNA含量,可以更好地估计DNA合成的实际速率,与胸腺嘧啶代谢无关。用[3H]胸腺嘧啶核苷脉冲处理过的非同步细胞被分为早期、中期和晚期S期制剂,以估算每个细胞的放射性量。每种方法预测的比率都有差异。通过每个细胞的DNA含量的荧光测量或通过每个细胞的平均DNA含量的二苯胺测量估计的速率表现出初始爆发的模式,随后是降低的速率,然后是最终爆发。通过电子细胞分选从对数期培养物中分离出的冈崎碎片以及早期、中期和晚期S期细胞中的放射性量也获得了类似的模式。通过测量整个细胞中的放射性量和纯化DNA的比活性来估算的速率显示出不同的模式,即最初的慢速率,然后是最大速率,最后是慢速率。

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