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.1981年4月;78(4):2072-6.
doi:10.1073/pnas.78.4.2072。

表达黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶编码大肠杆菌基因的动物细胞的筛选

表达黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶编码大肠杆菌基因的动物细胞的筛选

R C穆利根等人。 美国国家科学院程序. 1981年4月.

摘要

培养的猴子(TC7)和小鼠(3T6)细胞在用携带相应细菌基因Ecogpt的DNA载体转染后,合成大肠杆菌酶黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(XGPRT;5-磷酸-α-D-核糖-1-二磷酸:黄嘌呤磷酸核糖基转移酶,EC 2.4.2.22)。哺乳动物细胞不能有效地利用黄嘌呤合成嘌呤核苷酸,而产生大肠杆菌XGPRT的细胞可以通过XMP从黄嘌呤s合成GMP。用载体Ecogpt DNA转染后,产生XGPRT的存活细胞可以在含有阻断从头嘌呤核苷酸合成的抑制剂(氨基蝶呤和麦考酚酸)的介质中选择性生长,黄嘌呤是鸟嘌呤核酸形成的唯一前体。转化为Ecogpt的细胞出现频率为10(-4)到10(-5);在非选择性培养基中繁殖后,它们在XGPRT形成或在选择性培养基上生长的能力没有明显下降,因此它们在遗传上似乎是稳定的。尽管一些载体-gpt DNA可以在猴子和小鼠细胞中复制,但没有一个转化子包含自主复制的载体-gpt-DNA。相反,gpt转化子包含一到五个与细胞DNA序列相关的转染DNA拷贝,并且很可能整合到细胞DNA序列中。在几个转化子中,也合成了没有选择的矢量编码基因产物。这表明含有Ecogpt作为选择性标记的重组DNA可用于非选择性基因的共转化。

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    1. 自然。1979年1月11日;277(5692):108-14-公共医学
    1. 美国国家科学院院刊1977年12月;74(12):5350-4-公共医学
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    1. 《维罗尔杂志》。1979年4月;30(1):279-96-公共医学

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