跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

政府意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息,确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https(https)://确保您连接到官方网站,并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.1978年7月;14(3):569-85.
doi:10.1016/0092-8674(78)90243-x。

12型腺病毒转化仓鼠细胞基因组中病毒DNA序列的整合模式

腺病毒12型转化仓鼠细胞基因组中病毒DNA序列的整合模式

D萨特等。 单元格. 1978年7月.

摘要

在腺病毒12型(Ad12)转化的四个仓鼠细胞系中分析了病毒基因组的整合模式。此前已经证明,在每个细胞系HA12/7、T637、A2497-2和A2497-3中,病毒基因组存在多个拷贝,病毒DNA的不同部分以非化学计量学的方式表示(Fanning和Doerfler,1976)。当注射到仓鼠体内时,所有四种细胞系都是致癌的。在不同的实验中,用限制性内切酶Bam HI、Bgl II、Eco RI、Hind III、Hpa II或Sma I提取并切割每个细胞系的DNA。DNA片段在1%琼脂糖平板凝胶上分离,并通过Southern技术转移到硝化纤维过滤器。Ad12 DNA序列通过与Ad12 DNA杂交检测,Ad12 DNA通过缺口翻译标记为32P,随后通过放射自显影术检测。在一些实验中,使用Ad12 DNA的32P标记的Eco-RI限制性内切酶片段来研究病毒基因组特定片段在细胞DNA中的分布。对于每个细胞系,所用的每种限制性内切酶都观察到一种独特的整合病毒DNA序列的特定模式。此外,与分离的Eco-RI限制性内切酶片段互补的病毒序列也以每个细胞系特有的模式分布。四条不同路线之间的整合模式存在显著差异;也有相似之处。由于与正常细胞相比,病毒转化后的细胞基因的组织尚未确定,因此关于腺病毒DNA是否存在特定整合位点的结论似乎为时过早。对所研究的四个仓鼠品系中Ad12 DNA整合模式的分析表明,一些病毒DNA分子在整合之前或整合过程中片段化。对特异性限制性内切酶片段的分析表明,Eco RI B、D和E片段,包括病毒DNA 0.17-0.62分长度单位的连续片段,在整合到部分病毒DNA分子中时保持完整。虽然每个细胞系携带多个Ad12 DNA拷贝,但病毒DNA序列集中在少数不同大小的片段中。这一发现与病毒DNA序列的至少一部分整合到重复序列中,或者整合后病毒序列被扩增的概念相一致,但并没有证明。在所测试的三个细胞系中,整合模式在多代人中是稳定的,每周两次连续传代6-7个月。在所检测的三个细胞系中,在一些随机分离的克隆中,整合模式是相同的。因此,可以得出结论,在给定转化细胞系的群体中,所有细胞的整合模式是相同的。

PubMed免责声明

类似文章

引用人

LinkOut-更多资源