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.1984年3月30日;68(1-2):73-87.
doi:10.1016/0022-1759(84)90138-8。

分离少量细胞的离心淘析系统

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分离少量细胞的离心淘析系统

CG菲多尔等。 免疫学方法杂志. .
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摘要

离心淘析(CE)的一个主要缺点是各种组分的体积相对较大(150 ml),尤其是当必须分离少量细胞且组分中含有少量细胞时。为了减少馏分的体积,两个淘析器转子串联连接。由于第二个转子的转速始终高于第一个转子的750 rpm,因此从转子1淘洗的细胞收集在转子2中。在从转子1淘洗出完整部分并收集到转子2中后,从转子2收集细胞。这是通过流量分配装置(FDU)实现的,它可以断开两个转子的流量,同时反转第二个转子的流动。结果表明,40-95 X 10(6)个单核白细胞可在不损失分辨率的情况下,以9 ml的分数进行分离。获得的淋巴细胞(大于99%)和单核细胞亚群(88-94%)与仅用1个转子进行CE时的纯度相同。此外,在收获之前,可以使用FDU清洗转子2中的细胞并将其悬浮在培养基中。这样就避免了额外离心步骤造成的细胞损失。用NH4Cl溶解某些淋巴细胞组分中的红细胞(RBC),在溶解RBC并洗脱鬼影和碎片后,清洗并收获细胞。该程序不影响淋巴细胞的细胞活力和PHA反应。所述的多功能系统使CE能够在不损失分辨率的情况下分离少量细胞,并证明CE最适合浓缩和清洗细胞,以及去除污染的红细胞,而不影响细胞的回收、活力和功能。

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