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.1983年2月；3(2):280-9.

doi:10.1128/mcb.3.2.280-289.1983。

一种允许在哺乳动物细胞中表达cDNA插入物的cDNA克隆载体

H冈山, P Berg公司

PMID： 6300662
PMCID公司：项目经理368532
DOI（操作界面）： 10.1128/mcb.3.2.280-289.1983年

一种允许在哺乳动物细胞中表达cDNA插入物的cDNA克隆载体

H冈山等。分子细胞生物学. 1983年2月.

.1983年2月；3(2):280-9.

doi:10.1128/mcb.3.2.280-289.1983。

作者

H冈山, P Berg公司

PMID： 6300662
PMCID公司：项目经理368532
DOI（操作界面）： 10.1128/mcb.3.2.280-289.1983年

摘要

本文描述了一种用于在大肠杆菌中克隆cDNA的质粒载体；同样的载体也促进了cDNA片段在哺乳动物细胞中的表达。猿猴病毒40（SV40）衍生的DNA片段排列在pcD载体中，以允许克隆cDNA片段的转录、剪接和多聚腺苷化。包含SV40早期区域启动子和两个通常用于剪接病毒16S和19S晚期mRNA的内含子的DNA片段位于cDNA克隆位点的上游，以确保cDNA转录物的转录和剪接。SV40晚期区域多聚腺苷酸化序列发生在cDNA克隆位点的下游，因此cDNA转录物获得多聚腺苷酸3'末端。通过使用pcD-α-球蛋白cDNA作为模型，我们证实了转染细胞中产生的α-球蛋白质转录物被正确启动，在两个内含子中的任何一个处剪接，并在cDNA片段编码的位点或远端SV40多聚腺苷化信号处进行聚腺苷酸化。用SV40转化的人类成纤维细胞的mRNA构建的cDNA克隆库和该载体（约1.4 X 10（6）个克隆）产生了表达次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶的全长cDNA克隆（Jolly等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，出版）。

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