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.1982年8月;30(1):295-304.
doi:10.1016/0092-8674(82)90035-6。

单纯疱疹病毒扩增子:一种新的真核缺陷病毒克隆扩增载体

单纯疱疹病毒扩增子:一种新的真核缺陷病毒克隆扩增载体

R R铲等。 单元格. 1982年8月.

摘要

我们利用单纯疱疹病毒(HSV)缺陷基因组的重复单元,获得了一种克隆扩增载体(amplicon),该载体可以在标准HSV辅助病毒存在的真核细胞中复制。HSV扩增子系统的设计基于先前的观察,即用辅助病毒DNA和HSV缺陷基因组的种子单体重复单元共同转染细胞会导致由种子重复的多次重复组成的级联缺陷基因组的再生。细胞与辅助病毒DNA和包含细菌质粒pKC7 DNA的嵌合重复单元共转染导致产生由HSV-pKC7重复序列重复组成的缺陷基因组。这些嵌合缺陷基因组被包装成病毒颗粒,可以在病毒库中繁殖,最丰富的传代包含90%以上的嵌合缺陷基因。此外,单体嵌合重复单元可以在细菌和真核细胞之间来回传递。构建一种衍生载体以包含几个独特的限制性内切酶位点,可能用于将额外的病毒或真核生物DNA序列引入真核生物细胞。

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