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.1980年11月;22(第1部分):231-42。
doi:10.1016/0092-8674(80)90171-3。

主要腺病毒相关病毒mRNA新启动子的定义

主要腺病毒相关病毒mRNA新启动子的定义

M R绿色等。 单元格. 1980年11月.

摘要

一个660核苷酸腺病毒相关病毒2型(AAV2)DNA片段被克隆到pBR322中,该片段编码主要病毒mRNA的5'末端先导和整个干预序列,并已确定其一级序列。通过对与RNA 5’末端区域互补的5’末端标记的DNA引物的逆转录酶cDNA延伸产物进行测序,推导出5’末端病毒mRNA序列。从DNA和RNA序列的组合分析(证实了我们之前的绘图数据)中,我们得出结论,AAV2主要转录物包含一个5'末端先导序列,约55个核苷酸的长度由来自RNA体的320个碱基的DNA连续区域(病毒基因组上近39位)编码。剪接连接的DNA序列与其他II类基因的DNA序列相似。在5'末端没有其他核苷酸序列,表明在另一个(上游)位点有促进作用。编码和侧翼先导序列的DNA区域显示了II类基因启动子的预期结构特征,包括假定起始位点上游的典型ATAA序列23-25碱基。当克隆的病毒DNA片段在体外由RNA聚合酶II在无细胞系统中转录时,产生的转录物具有与体内mRNA相似或相同的5'末端。综上所述,这些数据强烈表明,主要多体RNA可能由启动子位于39位的转录单元生成,即使该转录单元是上游启动子位于6位附近的较大转录单元的一部分。这种具有独立启动子的重叠转录单位的迹象为细小病毒基因表达提供了一个重要的新视角。

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