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.1982年12月;79(23):7233-7.
doi:10.1073/pnas.79.23.7233。

小牛胸腺RNA聚合酶II单克隆抗体抑制酶-DNA复合物的形成

小牛胸腺RNA聚合酶II单克隆抗体抑制酶-DNA复合物的形成

S B卡罗尔等人。 美国国家科学院程序. 1982年12月.

摘要

针对纯化的小牛胸腺RNA聚合酶II(RNA核苷酸转移酶,酶代码EC2.7.7.6)制备单克隆抗体。根据固相检测中结合RNA聚合酶II的能力和清除抗免疫球蛋白抗体沉淀的复合物溶液中酶活性的能力,确定了两种不同的抗体。一种单克隆抗体直接抑制溶液中的酶活性。对该抗体抑制酶的机制的详细研究表明,它阻止了酶-DNA复合物的形成,并且对链延长没有影响。抑制DNA结合和催化活性取决于抗体与酶的预孵育,并且是不可逆的。在没有预培养的情况下,酶在抗体存在的情况下很容易与DNA结合,这表明游离酶与DNA的结合速度比抗体与酶的结合速度快。在竞争性免疫分析中,与游离酶相比,酶-DNA复合物与抗体的反应要小得多,这表明DNA要么阻断抗原位点,要么改变酶的构象,阻止抗体识别。这些抗体可作为分析RNA聚合酶结构和功能的有用试剂。

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引用人

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    1. 生物化学杂志。1981年11月25日;256(22):11798-803-公共医学
    1. 生物化学杂志。1982年3月10日;257(5):2613-8-公共医学
    1. 生物化学杂志。1982年5月25日;257(10):5884-92-公共医学
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    1. 分子生物学杂志。1972年9月28日;70(2):187-95-公共医学