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.1967年9月;34(3):757-71.
doi:10.1083/jcb.34.3.757。

超薄冰冻切片。一、方法和超微结构保存

超薄冰冻切片。一、方法和超微结构保存

W伯恩哈德等。 J细胞生物学. 1967年9月.

摘要

已经开发出一种相对简单的方法,用于获得电子显微镜用超薄冰冻切片。可以使用组织、培养细胞和细菌。将其固定在1.25-4%戊二醛中1-4小时,在3℃的缓冲液中清洗过夜,并嵌入20%的硫代明胶或纯明胶中。在切片之前,他们在50%的甘油中部分脱水,在液氮中冷冻在改良的组织架上,然后用干冰保持在-70摄氏度。最后,用玻璃刀在稍加改进的Porter-Blum MT-1切片机上,在一个保持在-35℃的商业速冻机上快速切片,并在40%二甲基亚砜(DMSO)溶液中漂浮在刀槽中。将切片放入塑料环中,在室温下转移到蒸馏水中解冻并去除二甲基亚砜,放置在涂有Formvar和碳的网格上,风干,并用磷钨酸、硅钨酸钠或四氧化锇、醋酸铀酰和铅的三重染色剂染色。获得了大的扁平截面,其中超微结构保存良好。它们对细胞化学研究特别有用。

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类似文章

引用人

工具书类

    1. 细胞生物学杂志。1965年7月;26(1):137-55-公共医学
    1. 《超结构研究杂志》1966年2月;14(3):356-78-公共医学
    1. 《超微结构研究杂志》,1967年7月;19(1):196-9-公共医学
    1. 细胞生物学杂志。1967年9月;34(3):773-86-公共医学
    1. Anat Rec.1957年5月;128(1):91-111-公共医学