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.1985年1月;100(1):27-34.
doi:10.1083/jcb.100.1.27。

培养成纤维细胞中荧光鞘磷脂的细胞内移位:内源性合成的鞘磷脂和糖脑苷脂类似物通过高尔基体到达质膜

培养成纤维细胞中荧光鞘磷脂的细胞内移位:内源性合成的鞘磷脂和糖脑苷脂类似物通过高尔基体到达质膜

N G利普斯基等人。 J细胞生物学. 1985年1月.

摘要

当中国仓鼠肺成纤维细胞单层培养物与荧光鞘脂类似物C6-NBD陶瓷(N-[7-(4-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑)]氨基己酰鞘氨醇)在2℃下短暂孵育时,线粒体、内质网和核膜发生荧光标记。在37摄氏度的进一步培养过程中,高尔基体和随后的质膜会发出强烈的荧光。在此期间,C6-NBD陶瓷转化为等量的荧光鞘磷脂和葡萄糖脑苷脂(Lipsky,N.G.和R.E.Pagano,1983,美国国家科学院院刊,80:2608-2612)。在本研究中,通过荧光显微镜、离子载体莫能菌素的添加和“反向交换”技术,研究了这些代谢物的细胞内移位及其在质膜上的后续表现其中,存在于细胞表面的荧光脂质的数量和类型是在它们从细胞表面转移到受体囊泡后确定的。在对照细胞中,37℃孵育期间,可通过反向交换从细胞表面去除的荧光葡糖苷和鞘磷脂的数量增加,与显微镜观察到的质膜荧光增加相关。在10μM莫能菌素存在的情况下,质膜的可见标记大大减少,而高尔基体变得高度荧光并膨胀。通过反向交换从细胞表面去除荧光代谢物的能力被莫能菌素显著但可逆地抑制。莫能新还增加了荧光鞘磷脂的总量,但没有增加细胞中发现的葡萄糖脑苷脂。亚细胞组分被检测其将放射性标记和荧光神经酰胺转化为相应的鞘磷脂和葡萄糖脑苷脂的能力。平行组分的活性一致,表明NBD部分的存在并不影响神经酰胺的细胞代谢。此外,鞘磷脂和糖苷合成活性的主峰似乎与高尔基体富集部分一致。这些结果强烈表明,荧光鞘磷脂并没有像最近提出的内源性鞘磷脂那样在质膜上合成。相反,鞘磷脂和葡萄糖脑苷类似物都是由C6 NBD神经酰胺在细胞内合成的,并通过高尔基体转移到细胞表面。

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引用人

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    1. Biochim生物物理学报。1984年5月11日;793(3):346-53-公共医学
    1. 生物化学。1984年3月13日;23(6):1043-6-公共医学
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    1. 生物化学杂志。1958年12月;233(6):1315-22-公共医学
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