Purification and characterization of human liver "high Km" aldehyde dehydrogenase and its identification as glutamic gamma-semialdehyde dehydrogenase

.1986年2月15日；261(5):2154-63.

人肝“高Km”醛脱氢酶的纯化、表征及其谷氨酸-γ-三聚甲醛脱氢酶的鉴定

C M Forte-McRobbie公司, R Pietruszko先生

PMID： 3944130

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人肝“高Km”醛脱氢酶的纯化、表征及其谷氨酸-γ-三聚甲醛脱氢酶的鉴定

C M Forte-McRobbie公司等。生物化学杂志. 1986.

免费文章

.1986年2月15日；261(5):2154-63.

作者

C M Forte-McRobbie公司, R Pietruszko先生

PMID： 3944130

摘要

以前被认为是人肝醛脱氢酶（NAD+）同工酶（E4，ALDH IV）（酶代码EC1.2.1.3）的酶已通过CM-Sephadex上的离子交换色谱和Blue Sepharose CL-6B和5'-AMP Sepharose4B上的亲和色谱纯化到均一性，并鉴定为谷氨酸γ-三聚甲醛脱氢酶，或更准确地说，1-吡咯烷-5-羧酸脱氢酶（酶代码EC1.5.1.12）。谷氨酸γ-三聚甲醛脱氢酶之前从未从任何哺乳动物物种中纯化到同质性。均质酶在等电聚焦凝胶上表现为两条细带，由0.12个pH单位隔开：pI=6.89和6.77。此外，酶在梯度凝胶中也表现为两条带；然而，在含有十二烷基硫酸钠的聚丙烯酰胺凝胶中，酶以一条带的形式迁移，表明其亚基大小相同。因为酶分子比醛脱氢酶分子小得多（Mr约142000-170000）（酶代码EC1.2.1.3）（Greenfield，N.J.和Pietruszko，R.（1977）Biochim。生物物理学。学报483，35-45；Mr约为220000），其亚基重量不同（E1和E2同工酶的亚基重量分别为70600和54000），该酶不是先前描述的醛脱氢酶同工酶。谷氨酸γ-三聚甲醛脱氢酶与乙醛和丙醛的迈克尔斯常数在毫摩尔范围内。它在直链脂肪醛系列中的底物特异性基本上局限于乙醛和丙醛，而丁醛和长链醛类的活性相对较低。除谷氨酸γ-三聚甲醛外，其他底物还包括琥珀酸、戊二酸和己二酸半醛。与谷氨酸γ-三聚甲醛的反应速度至少比与羧酸半醛的反应速度大一个数量级。天冬氨酸β-半醛不是底物。催化的反应似乎是不可逆的。虽然可以使用NADP，但NAD是首选辅酶。这种酶还表现出一种不寻常的特性，即受到NAD的底物抑制。

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