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.1986年11月;6(11):3265-74.
doi:10.1523/JNEUROSCI.06-11-03265.1986。

鸡胚运动神经元的分离及其体外存活

鸡胚运动神经元的分离及其体外存活

R J奥布莱恩等人。 神经科学. 1986年11月.

摘要

这是我们描述兴奋性氨基酸受体在胚胎小鸡运动神经元上的调节的4篇系列论文中的第一篇,这些运动神经元从外侧运动柱分离出来,并维持在细胞培养中。描述了用小麦胚芽凝集素(Fl-WGA)的荧光素黄或异硫氰酸荧光素结合物标记活体内鸡胚运动神经元的技术。我们估计,外侧运动柱中65-95%的运动神经元在组织分离后存活下来,并定居在适当的培养表面上。在异质性脊髓细胞培养中观察到的荧光运动神经元数量减少,半衰期为2天。这种减少是由于荧光示踪剂的褪色,而不是由于细胞的丢失。还描述了使用荧光激活细胞分选器从其他脊髓细胞分离运动神经元的技术。侧运动柱中约24%的运动神经元可以被分离,在接种有分选细胞的培养物中,运动神经元占90%以上。在骨骼肌管或肌肉条件培养基的存在下,分选和未分选的运动神经元在体外的存活率提高,但非运动神经元的存活率不受肌肉的影响。用斑贴技术测定分类和未分类运动神经元的电生理特性是相似的。两者与成熟运动神经元的不同之处在于其静息膜电位较低(-50 mV),输入电阻较大(450 MΩ),时间常数较长(39 msec)。此外,在超极化后,它们没有表现出异常整流或钙激活钾。在没有中间神经元的情况下生长的运动神经元不同于异质性脊髓细胞培养中的运动神经元,因为它们的轴突(树突)较短,分支较少。

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