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doi:10.1016/bs.mcb.2022.12.023。 Epub 2023年2月16日。

启动SEM阵列层析的实用指南——一种可访问的体EM技术

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启动SEM阵列层析的实用指南——一种可访问的体EM技术

伊恩·怀特等。 方法细胞生物学. 2023.

摘要

这些统称为体积电子显微镜(vEM)的技术都有各自的优势和挑战,使其或多或少适用于任何特定项目。SEM阵列层析成像(SEM-AT)在这方面当然没有什么不同。SEM-AT需要显微切割技能,并且需要更多的数据对齐后成像,这给用户带来了挑战,然而,作为常规EM设施最灵活、最具成本效益和潜在可访问性的vEM方法,由于其固有的非破坏性,它使这些用户受益匪浅。这里描述了SEM-AT的一般原理和优缺点,以及从块修剪、切片和盖玻片收集到高分辨率3D数据集对齐的工作流程分步指南。有了合适的SEM/背散射电子探测器设置和电子显微镜实验室中容易找到的设备,就可以开始获取三维超微结构数据。通过添加适当的SEM-AT成像软件,可以显著增强此过程,以自动成像数百个甚至数千个截面。硬件和软件的进步以及未来的改进只会使这一点变得更容易,因为SEM-AT可能成为世界各地的常规vEM技术,而不是有限专业设施中少数专家的特权。

关键词:阵列层析成像;非破坏性;SEM-AT;扫描电子显微镜;断面线形;序列段;超微切片;体积电子显微镜。

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