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.1988年3月22日;27(6):2109-20.
doi:10.1021/bi00406a044。

新合成组蛋白的沉积:杂交核小体并不是垂直排列在子DNA链上

附属公司

新合成组蛋白的沉积:杂交核小体并不是垂直排列在子DNA链上

V杰克逊. 生物化学. .

摘要

密度标记程序已用于研究体内组蛋白-甾体相互作用的动力学。用高密度氨基酸标记细胞60分钟,并追踪标记长达22小时(这些细胞的两次复制事件)。分离细胞核并用甲醛处理,以通过共价交联稳定组蛋白-链节相互作用,共价交联产生H3、H2B、H2A和H4各两个八聚体复合物。然后从DNA中提取该复合物并进行密度梯度分析。结果表明,新的H3、H4以四聚体的形式沉积,在随后的追逐中不解离。新的H2A、H2B以二聚体的形式沉积,并且在随后的追逐中也不离解。这些新的组蛋白与旧的组蛋白形成混合八聚体。根据杂交八聚体的新旧比率,我们提出来自基因组其他地方的额外旧H2A、H2B与新H3、H4的四聚体相互作用,形成新合成的核小体。还观察到,甲醛产生的交联络合物中有5%是八聚体-八聚体(二聚体)。通过对二聚体密度的分析,发现杂化八聚体与含有正常密度组蛋白的均质八聚体相邻。对照实验表明,八聚体-八聚体交联是核小体之间链内而非链间相互作用的产物。这些相同的对照实验还表明,在密度梯度分析之前的制备过程中,这些程序不会诱导组蛋白交换。讨论了这些结果对复制叉处组蛋白-甾体相互作用动力学的意义以及在维持分化中的潜在作用。

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