Inhibition of malignant human bladder cancer phenotypes through the down-regulation of the long non-coding RNA SNHG7

doi:10.7150/jca.25507

。2019年1月1日；10(2):539-546.

doi:10.7150/jca.25507。 2019年eCollection。

通过下调长非编码RNA SNHG7抑制人膀胱癌恶性表型

徐从杰¹, 周家泉¹, 杨旺（Yang Wang）¹, 王安芳¹, 苏良菊¹, 刘栓（Shuan Liu）¹, 新力康¹

附属机构

PMID： 30719150
预防性维修识别码： PMC6360294型
内政部： 10.7150日元/日元25507日元

通过下调长非编码RNA SNHG7抑制人膀胱癌恶性表型

徐从杰等。 J癌症。 2019。

。2019年1月1日；10(2):539-546.

doi:10.7150/jca.25507。 2019年eCollection。

作者

徐从杰¹, 周家泉¹, 杨旺（Yang Wang）¹, 王安芳¹, 苏良菊¹, 刘栓（Shuan Liu）¹, 新力康¹

附属

¹海南总医院，海口570311，中国。

PMID： 30719150
预防性维修识别码： PMC6360294型
内政部： 10.7150/jca.25507年

摘要

大量证据表明，长非编码RNA在肿瘤的发生发展中起着重要作用。在本研究中，我们的主要目的是探索lncRNA SNHG7与人膀胱癌细胞的关系，从而为膀胱癌的治疗和诊断寻找新的靶点。使用实时定量聚合酶链反应评估lncRNA SNHG7在72例诊断为尿路上皮性膀胱癌的患者的膀胱肿瘤组织和配对的相邻正常组织中的表达。我们根据分级和分期分析了表达的差异。用lncRNA SNHG7-特异性siRNA和阴性对照siRNA瞬时转染人膀胱癌细胞株UMUC、5637、T24和SW780，采用CCK-8法、创伤愈合法和ELISA法检测转染后膀胱癌细胞恶性表型的变化。我们发现lncRNA SNHG7与人类膀胱癌相关。与配对正常组织相比，lncRNA SNHG7在膀胱癌组织中过度表达，并且SNHG7-在高级别肿瘤中的表达高于低级别肿瘤。当我们抑制lncRNA SNHG7在几个膀胱细胞系中的表达时，恶性表型被显著抑制。SNHG7在人类膀胱癌中起致癌作用，可能是治疗膀胱癌的潜在新靶点。

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利益冲突声明

竞争利益：作者声明不存在竞争利益。

数字

图1
**LncRNA-SNHG7在膀胱癌中过度表达。**利用qRT-PCR检测lncRNA-SNHG7的相对表达。A：图表中各列的高度表示原木₂-72例患者lncRNA-SNHG7表达的转化褶皱变化（肿瘤/正常）。B： lncRNA-SNHG7在高级别恶性肿瘤中的表达显著高于低级别恶性肿瘤（P<0.01）。C：浸润性癌中lncRNA-SNHG7的表达高于非浸润性癌。数据显示为平均值±SEM。

图2
**敲低lncRNA-SNHG7抑制细胞增殖。**采用CCK-8法检测细胞增殖。转染lncRNA-SNHG7或阴性对照siRNA后，我们测量OD₄₅₀值并将其转换为单元格编号。利用方差分析比较细胞增殖曲线。A：膀胱癌细胞株SW780的细胞增殖抑制。B：膀胱癌细胞株T24的细胞增殖抑制。C：膀胱癌细胞系UMUC的细胞增殖抑制。D：膀胱癌细胞系5637的细胞增殖抑制。数据显示为平均值±SD。所有癌细胞系的每个实验均进行三次，每次独立进行三次。（*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001）

图3
**敲低lncRNA-SNHG7诱导细胞凋亡。**将lncRNA-SNHG7或阴性对照siRNA转染膀胱癌细胞48小时。我们用ELISA测定了细胞凋亡的变化。ELISA法检测lncRNA-SNHG7 siRNA-转染膀胱癌细胞株SW780（A）、T24（B）、UMUC（C）和5637（D）的凋亡诱导作用（P<0.01）。数据显示为平均值±标准差。我们在所有细胞系中进行了三次独立的实验，一式三份。

图4
**lncRNA-SNHG7基因敲除降低了细胞运动。**在转染lncRNA-SNHG7或阴性对照siRNA后，我们使用伤口愈合试验评估膀胱癌细胞的运动变化。A： SW780细胞系伤口愈合试验的代表性图像，SW780的细胞系运动能力下降（P<0.01）。B： T24细胞系伤口愈合试验的代表性图像，T24细胞的运动性降低（P<0.01）。C： UMUC细胞系伤口愈合试验的代表性图像，UMUC的细胞系运动性降低（P<0.01）。D： 5637细胞系伤口愈合试验的代表性图像，5637细胞的运动性降低（P<0.01）。

图5
**敲低lncRNA-SNHG7可减少细胞侵袭。**转染lncRNA-SNHG7或阴性对照siRNA后，采用Transwell法检测膀胱癌细胞的侵袭性。A.T24细胞中Transwell分析的代表性图像。B.SW780细胞中Transwell分析的代表性图像。C.UMUC细胞中Transwell分析的代表性图像。D.在5637个细胞中进行Transwell分析的代表性图像。

图6
**敲除FAL1增加了p21、Bax和E-cadherin蛋白的表达。**转染lncRNA-SNHG7或阴性对照siRNA后，用western blotting检测膀胱癌细胞p21、Bax和E-cadherin表达的变化。A.T24细胞中蛋白质印迹的典型图像。B.SW780细胞的典型蛋白质印迹图像。C.UMUC细胞中蛋白质印迹的典型图像。D.5637个细胞的典型蛋白质印迹图像。

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