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.1986年4月;154(1):353-60.
doi:10.1016/0003-2697(86)90536-1。

特异性时间定向DNA测序

特异性引物定向DNA测序

E C施特劳斯等。 Ana Biochem公司. 1986年4月.

摘要

描述了一种基于桑格链终止法的简单快速的DNA序列分析策略。该程序利用克隆到M13噬菌体载体的1至4 kb DNA的全尺寸插入物。在用商用通用载体引物确定插入DNA的第一个600-650 bp的序列后,利用从序列的3'端获得的序列数据合成特定的寡核苷酸,并将其用作引物,以扩展对另一个600-650bp核苷酸的序列分析。以类似的方式合成额外的引物,直到确定了整个插入DNA的核苷酸序列。讨论了寡核苷酸长度和组成的选择以及未纯化引物的使用的一般准则。使用特定的双脱氧核苷酸序列分析方法,结合高度纯化的单链模板DNA,大大减少了分析大片段DNA所需的时间。

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