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.1985年1月25日;260(2):1166-76.

非洲爪蟾卵母细胞细胞核中两种不同类型可溶性组蛋白复合物的共存

  • PMID: 2981836
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非洲爪蟾卵母细胞细胞核中两种不同类型可溶性组蛋白复合物的共存

J A Kleinschmidt公司等。 生物化学杂志. .
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摘要

非洲爪蟾卵母细胞中可溶性组蛋白的核池被组织成两种主要类型的酸性组蛋白复合物,通过蔗糖密度梯度离心分离。一种5 S的复合沉积物(Mr约120000)在pH 4.6下是等电的,含有组蛋白H3和/或H4,与一对极酸性多肽的一种多肽紧密结合,命名为N1和N2(Kleinschmidt,J.a.和Franke,W.W.(1982)Cell 29,799-809)。这种复合物可以被针对纯化蛋白N1/N2的豚鼠抗体选择性免疫沉淀。相比之下,7 S的更大复合体包含四种组蛋白和核浆蛋白(纯化的蛋白质是约30000 Mr多肽的五聚体),在pH值为5-7的范围内具有等电性,并且可以通过核浆蛋白抗体进行免疫沉淀。通过凝胶过滤、蔗糖密度梯度离心和交联复合物的十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定,其相对分子量为130000-170000,不包括组蛋白八聚体与核浆蛋白的结合。除组蛋白H2A和H2B外,两种组蛋白(命名为H3和H4)在电泳迁移率方面与组蛋白H3和H2B相似,但具有较低的等电pH值,在用核质抗体获得的免疫沉淀中富集。在接近生理离子强度和pH值的条件下,使用1%甲醛在完整细胞核中存在的复合物的交叉链接表明这两种可溶组蛋白复合物在活细胞中共存。在使用SV 40 DNA的染色质组装实验中,两种组蛋白组分都能够将组蛋白转移到DNA,导致DNA超诱导增加,并形成核小体形态的串珠核蛋白复合物。强调了控制这两种复合物的共同原理,即一个或两个组蛋白分子与亲核大酸性组蛋白结合蛋白的结合。我们讨论了这些复合物在储存两栖类早期胚胎发生期间用于染色质组装的组蛋白方面的可能作用,以及体细胞中可能存在类似复合物,尽管浓度较低。

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