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.1979年8月;76(8):3683-7.
doi:10.1073/pnas.76.8.3683。

琼脂糖凝胶中大片段DNA的高效转移及硫酸葡聚糖快速杂交

琼脂糖凝胶中大片段DNA的高效转移及硫酸葡聚糖快速杂交

G M Wahl公司等。 美国国家科学院程序. 1979年8月.

摘要

我们描述了一种将电泳分离的双链DNA条带从琼脂糖凝胶转移到重氮苯甲氧基甲基板的技术。通过用稀酸进行顺序处理,控制DNA的原位切割,这会导致部分脱尿,而稀碱则会导致链的切割和分离,这使得DNA能够快速、完全地离开凝胶,其效率与凝胶的大小无关。DNA与纸张的共价连接可防止后续杂交和清洗步骤中的损失,并允许一张纸多次重复使用。最初发现,10%的硫酸葡聚糖可将溶液中的DNA杂交速度提高约10倍[J.G.Wetmur(1975)Biopolymers 14,2517-2524],可将随机切割的双链DNA探针与固定核酸的杂交速度提高100倍,而不会显著增加背景。

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    1. 美国国家科学院院刊1978年11月;75(11):5631-5-公共医学
    1. 美国国家科学院院刊,1978年3月;75(3):1222-6-公共医学
    1. 分子生物学杂志。1977年6月15日;113(1):237-51-公共医学
    1. 生物化学与生物物理研究委员会。1978年12月14日;85(3):1104-12-公共医学
    1. 核酸研究,1979年1月;6(1):195-203-公共医学

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