An HNF4α-microRNA-194/192 signaling axis maintains hepatic cell function

doi:10.1074/jbc.M117.785592

.2017年6月23日；292(25):10574-10585.

doi:10.1074/jbc。M117.785592。 Epub 2017年5月2日。

HNF4α-microRNA-194/192信号轴维持肝细胞功能

附属公司

¹来自日本群马376-8515，Kiryu，群马大学科技学院分子科学部分子生命科学实验室。
²日本冈山北区冈山大学医学、牙科和药物科学研究生院细胞生物学系，邮编：700-8558。
^三马里兰州贝塞斯达国立卫生研究院NCI癌症研究中心代谢实验室，邮编：20852。
⁴来自日本群马376-8515，Kiryu，群马大学科技学院分子科学部分子生命科学实验室，yinoue@guarma-u.ac.jp。

PMID： 28465351
预防性维修识别码：项目经理5481564
内政部： 10.1074/jbc。M117.785592

HNF4α-microRNA-194/192信号轴维持肝细胞功能

森本茂（Aoi Morimoto）等。生物化学杂志. 2017.

.2017年6月23日；292(25):10574-10585.

doi:10.1074/jbc。M117.785592。 Epub 2017年5月2日。

附属公司

¹来自日本群马376-8515，Kiryu，群马大学科技学院分子科学部分子生命科学实验室。
²日本冈山北区冈山大学医学、牙科和药物科学研究生院细胞生物学系，邮编：700-8558。
^三马里兰州贝塞斯达国立卫生研究院NCI癌症研究中心代谢实验室，邮编：20852。
⁴来自日本群马376-8515，Kiryu，群马大学科技学院分子科学部分子生命科学实验室，yinoue@guarma-u.ac.jp。

PMID： 28465351
预防性维修识别码：项目经理5481564
内政部： 10.1074/jbc。M117.785592

摘要

肝细胞核因子4α（HNF4α）控制肝脏特异性蛋白编码基因的表达。然而，一些microRNAs也受到HNF4α的调节，目前尚不清楚它们是否是HNF4β的直接靶点以及是否影响肝功能。在这项研究中，我们发现HNF4α调节microRNA，表现为肝脏特异性miR-194和miR-192（miR-194/192）的显著下调Hnf4a型-空(Hnf4a型^ΔH)老鼠。共享miR-194/192启动子的反激活依赖于HNF4α的表达，表明miR-194/192是HNF4β的靶基因。miR-194/192靶向潜在mRNA的筛选显示，参与葡萄糖代谢的基因表达（糖原1(陀螺1))细胞粘附和迁移（活化的白细胞粘附分子(阿尔卡姆))、肿瘤发生和肿瘤进展(说唱2b和前egulin(埃雷格))，蛋白质SUMO化(Sumo2系列)表观遗传调控(设置5和Cullin 4B(氯4b))和上皮-间质转化（moesin(Msn号))在中上调Hnf4a型^ΔH老鼠。此外，我们还发现miR-194/192结合这些mRNA的3'-UTR。HNF4α的siRNA敲除抑制了人肝细胞癌（HCC）细胞中miR-194/192的表达，并导致其mRNA靶点上调。miR-194/192的抑制和过度表达实验表明陀螺1,设置5,Sumo2系列,氯4b、和说唱2b是miR-194目标，而埃雷格,阿尔卡姆、和Msn号是miR-192目标。这些发现揭示了由miR-194/192控制的新型HNF4α网络，该网络可能通过抑制去分化和肿瘤发生相关基因的表达，在维持肝细胞分化状态中发挥关键作用。这些见解可能有助于开发早期HCC检测的诊断标记物，而miR-194/192通路的靶向性可能对HCC的治疗有用。

关键词：基因调控；肝细胞核因子4（HNF-4）；肝脏；小RNA（miRNA）；转录。

PubMed免责声明

利益冲突声明

作者声明，他们与本文的内容没有利益冲突

数字

**图1。**
**肝miRNA的下调*Hnf4a型*^ΔH老鼠。**miR-194、miR-192、miR-21、miR-101b、miR-130a、miR-193、miR193b、miR455和miR-805的实时PCR数据(A类)、pri-miR-194–1和pri-miR-144–2(B类)、和*Hnf1a型*和*Hnf4a型*(D类)来自*Hnf4a型*^ΔH和*Hnf4a型*^{飞行/飞行}小鼠和miR-194和miR-192(C类)和*Hnf1a型*和*Hnf4a型*(E类)来自肝脏总RNAHnf1a型^−/−和*Hnf1a型*^+/+展示的是老鼠。*误差线*表示S.D.数据是四只独立小鼠的平均值±S.D.。*，第页< 0.05.

**图2。**
**肝脏的表达*第53页*和*Cdkn1a型*在里面*Hnf4a型*^ΔH和*Hnf1a型*-使鼠标无效。**实时PCR数据*第53页*(A类和C类)和*Cdkn1a型*(B类和D类)来自肝脏特异性总RNAHnf4a型^ΔH和*Hnf4a型*^{飞行/飞行}老鼠(A类和B类)和*Hnf1a型*-空(*Hnf1a型*^−/−)和控制(*Hnf1a型*^+/+)老鼠(C类和D类)如图所示。*误差线*表示S.D.数据是四只独立小鼠的平均值±S.D.。*，第页< 0.05.

**图3。**
**人类miR-194/192基因的启动子分析。** A类，人类miR-194/192基因启动子区的示意图。B类将miR-194/192基因（WT）启动子构建物转染HepG2细胞。C类，将突变导入HNF4α结合位点（M1和M2），并将构建物转染HepG2细胞。D类和E类用空载体将WT启动子构建物和miR-194/192基因的突变体（M1和M2）转染到HEK293T细胞(*白色条*)或HNF4α表达载体(*黑色条*). 归一化活性表示为基于无启动子载体pGL4.11的相对活性。*误差线*表示S.D.数据是三个独立实验的平均值±S.D。

**图4。**
**miR-194/192启动子中HNF4α结合位点的鉴定。** A类凝胶位移分析。HepG2细胞的核提取物与携带末端的生物素标记探针孵育(*左车道*)和近端(*右车道*)缺失miR-194/192启动子中的HNF4α结合位点(*车道2*)或存在50倍多余的未标记miR-194/192探针(*车道3*)，突变的miR-194/192探针(*车道4*)和OTC探头(*车道5*). 对于超位移分析，添加了抗HNF4α和抗C/EBPα抗体(*车道6*和7). HNF4α与探针之间的络合物和超移络合物由降低和*上部箭头*分别是。B类用抗HNF4α抗体对HepG2细胞进行染色质免疫沉淀(*车道2*)和正常山羊IgG(*车道3*) (左边). 输入的DNA被用作阳性对照(*车道1*). 包含HNF4α结合位点的−201和−41之间的区域(+*HNF4型*α）在+16667和+16874之间，无HNF4α结合位点（−*HNF4型*α）人类miR-194/192基因被扩增。qPCR的数据相对于输入进行了归一化，并表示为倍富集(*正确的*).C类，染色质免疫沉淀法使用肝脏*Hnf4a型*^ΔH和*Hnf4a型*^{飞行/飞行}抗HNF4α抗体和正常山羊IgG小鼠。小鼠miR-194/192启动子中包含HNF4α结合位点的−164和−70之间的区域(左边)，介于−264和−165之间，在小鼠中包含两个HNF4α结合位点*安大略省*发起人(*正确的*)，在+45820和+45893之间，小鼠中没有HNF4α结合位点嗯2基因分别扩增。qPCR的数据相对于输入进行了归一化，并表示为IgG对照数据的倍富集。*误差线*表示S.D.数据是三个独立实验的平均值±S.D.。*，第页< 0.05.

**图5。**
**miR-194和miR-192靶基因在肝脏的表达*Hnf4a型*^ΔH老鼠。** A类，来自肝脏总RNA的实时PCRHnf4a型^ΔH和*Hnf4a型*^{飞行/飞行}老鼠。已知(A类)和新的(B类)miR-194的mRNA靶点以及已知和新靶点(C类)用于miR-192。*误差线*表示S.D.数据是五只独立小鼠的平均值±S.D.。*，第页< 0.05.D类CLN4B和ALCAM蛋白的Western blotHnf4a型^ΔH和*Hnf4a型*^{飞行/飞行}老鼠(n个=每个基因型3个）。CLN4B和ALCAM表达通过总蛋白归一化*Hnf4a型*^ΔH显示为相对于*Hnf4a型*^{飞行/飞行}老鼠。*哥伦比亚广播公司*考马斯亮蓝。

**图6。**
**miR-194和miR-192靶mRNA的3′-UTR活性。**含有miR-194靶mRNA的WT 3′-UTR的荧光素酶载体(A类)和miR-192(B类)用miR-194转染HEK293T细胞(*黑色条*)，miR-192(*条纹条*)，或阴性对照(数控;*白色条*). 将突变引入miR-194结合位点(*M（M）*).误差线表示S.D.数据是三个独立实验的平均值±S.D.。*，第页< 0.05.

**图7。**
**人肝癌细胞系中HNF4α–miR-194/192级联的保护。**siRNA（10 n米)转染HepG2细胞。HNF4α的实时PCR数据(A类)、miR-194和miR-192(B类)，并靶向miR-194和miR-192的mRNA(C类)如图所示。HNF4α的蛋白质印迹如所示*答：D*、miR-194和miR-192抑制剂（100 n米)转染HepG2细胞，实时PCR分析靶基因的相对表达。E类、miR-194和miR-192模拟（10 n米)转染HLE细胞，实时PCR分析靶基因的相对表达。*误差线*表示S.D.数据是三个独立实验的平均值±S.D.。*，第页< 0.05.数控，阴性对照；*哥伦比亚广播公司*考马斯亮蓝。

请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

成人肝细胞中APC和HNF4α的伴随缺失与β-catenin激活驱动的肝癌发生无关。
Sartor C、Bachelot L、Godard C、Lager F、Renault G、Gonzalez FJ、Perret C、Gougelet A、Colnot S。 Sartor C等人。 Liver Int.2019年4月；39(4):727-739. doi:10.1111/liv.14068。Epub 2019年2月24日。《2019年国际肝病》。 PMID：30721564 免费PMC文章。
丙型肝炎病毒抑制肝细胞核因子4α，这是肝细胞癌的关键调节因子。
瓦利亚努一世、达福·D、瓦西拉基·N、马夫罗马拉·P、哈佐普卢·卡拉达拉斯·M。 Vallianou I等人。国际生物化学与细胞生物学杂志。2016年9月；78:315-326. doi:10.1016/j.biocel.2016.07.027。Epub 2016年7月29日。国际生物化学与细胞生物学杂志。2016 PMID：27477312
肝细胞核因子4α（HNF4α）在细胞增殖和癌症中的作用。
Walesky C，Apte U。 Walesky C等人。基因表达。2015;16(3):101-8. doi:10.3727/105221615X14181438356292。基因表达。2015 PMID：25700366 免费PMC文章。审查。
MicroRNA-122通过靶向RhoA触发间质-上皮细胞转化并抑制肝癌细胞运动和侵袭。
王世聪、林XL、李杰、张TT、王慧、石JW、杨S、赵WT、谢瑞、魏F、秦YJ、陈磊、杨杰、姚KT、肖D。 Wang SC等人。公共科学图书馆一号。2014年7月3日；9（7）：e101330。doi:10.1371/journal.pone.0101330。2014年电子收集。公共科学图书馆一号。2014 PMID：24992599 免费PMC文章。
microRNA-122对肝癌的抗肿瘤作用。
Nakao K、Miyaaki H、Ichikawa T。 Nakao K等人。胃肠病学杂志。2014年4月；49(4):589-93. doi:10.1007/s00535-014-0932-4。Epub 2014年2月17日。胃肠病学杂志。2014 PMID：24531873 审查。

查看所有类似文章

引用人

组织修复和变性中的上皮-间充质转化。
Youssef KK，马萨诸塞州尼托。 Youssef KK等人。 Nat Rev Mol细胞生物学。2024年4月29日。doi:10.1038/s41580-024-00733-z。打印前在线。 Nat Rev Mol细胞生物学。2024 PMID：38684869 审查。
前致癌鞘磷脂代谢酶β-半乳糖神经酰胺酶调节BRAF（V600E）突变的人类黑色素瘤细胞的蛋白质组景观。
Capoferri D、Chiodelli P、Corli M、Belleri M、Scalvini E、Mignani L、Guerra J、Grillo E、De Giorgis V、Manfredi M、Presta M。 Capoferri D等人。国际分子科学杂志。2023年6月23日；24(13):10555. doi:10.3390/ijms241310555。国际分子科学杂志。2023 PMID：37445731 免费PMC文章。
棕榈酸诱导的microRNA-143-5p表达通过负调控JDP2促进视网膜色素上皮的上皮-间充质转化。
田毅，邵杰，白S，徐Z，毕C。田毅等。老龄化（纽约州奥尔巴尼）。2023年4月25日；15(9):3465-3479. doi:10.18632/aging.204684。Epub 2023年4月25日。老龄化（纽约州奥尔巴尼）。2023 PMID：37179125 免费PMC文章。
人类肝细胞核因子（HNF1和LXRb）调节HIV感染的南非黑人女性胆结石患者CYP7A1的初步研究。
Kinoo SM、Naidoo P、Singh B、Chutugoon A、Nagiah S。 Kinoo SM等人。人寿保险（巴塞尔）。2023年1月18日；13(2):273. doi:10.3390/life13020273。人寿保险（巴塞尔）。2023 PMID：36836631 免费PMC文章。
PPARα激活部分驱动肝特异性Hnf4a-null小鼠NAFLD的发展。
Kasano-Camones CI、Takizawa M、Ohsima N、Saito C、Iwasaki W、Nakagawa Y、Fujitani Y、Yoshida R、SaitoY、Izumi T、Terawaki SI、Sakaguchi M、Gonzalez FJ、Inoue Y。 Kasano-Camones CI等人。生物化学杂志。2023年4月26日；173(5):393-411. doi:10.1093/jb/mvad005。生物化学杂志。2023 PMID：36779417 免费PMC文章。

查看所有“被引用”文章

工具书类

1. Schrem H.、Klempnauer J.和Borlak J.（2002）《肝脏功能和发育中的富含肝脏的转录因子》。第一部分：肝细胞核因子网络与肝脏特异性基因表达。药理学。版次54，129–158-公共医学
1. Kuo C.J.、Conley P.B.、Chen L.、Sladek F.M.、Darnell J.E.Jr.和Crabtree G.R.（1992）哺乳动物细胞类型规范中涉及的转录层次。自然355，457–461-公共医学
1. Sladek F.M.和Seidel S.D.（2001）《肝细胞核因子4α》，载于《核受体与遗传病》（Burris T.P.和McCabe E.编辑）第309-361页，学术出版社，加利福尼亚州圣地亚哥
1. Späth G.F.和Weiss M.C.（1998）肝细胞核因子4刺激上皮标记基因的表达，在去分化肝癌细胞中充当形态原。细胞生物学杂志。140, 935–946-项目管理咨询公司-公共医学
1. Chen W.S.、Manova K.、Weinstein D.C.、Duncan S.A.、Plump A.S.、Prezioso V.R.、Bachvarova R.F.和Darnell J.E.Jr.（1994）内脏内胚层表达的HNF-4基因的破坏导致胚胎外胚层细胞死亡和小鼠胚胎原肠发育受损。基因发育8，2466–2477-公共医学

出版物类型

行动

MeSH术语

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

物质

行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动
行动

LinkOut-更多资源

[1] Schrem H.、Klempnauer J.和Borlak J.（2002）《肝脏功能和发育中的富含肝脏的转录因子》。第一部分：肝细胞核因子网络与肝脏特异性基因表达。药理学。版次54，129–158-公共医学

[2] Schrem H.、Klempnauer J.和Borlak J.（2002）《肝脏功能和发育中的富含肝脏的转录因子》。第一部分：肝细胞核因子网络与肝脏特异性基因表达。药理学。版次54，129–158-公共医学

[3] Kuo C.J.、Conley P.B.、Chen L.、Sladek F.M.、Darnell J.E.Jr.和Crabtree G.R.（1992）哺乳动物细胞类型规范中涉及的转录层次。自然355，457–461-公共医学

[4] Kuo C.J.、Conley P.B.、Chen L.、Sladek F.M.、Darnell J.E.Jr.和Crabtree G.R.（1992）哺乳动物细胞类型规范中涉及的转录层次。自然355，457–461-公共医学

[5] Sladek F.M.和Seidel S.D.（2001）《肝细胞核因子4α》，载于《核受体与遗传病》（Burris T.P.和McCabe E.编辑）第309-361页，学术出版社，加利福尼亚州圣地亚哥

[6] Sladek F.M.和Seidel S.D.（2001）《肝细胞核因子4α》，载于《核受体与遗传病》（Burris T.P.和McCabe E.编辑）第309-361页，学术出版社，加利福尼亚州圣地亚哥

[7] Späth G.F.和Weiss M.C.（1998）肝细胞核因子4刺激上皮标记基因的表达，在去分化肝癌细胞中充当形态原。细胞生物学杂志。140, 935–946-项目管理咨询公司-公共医学

[8] Späth G.F.和Weiss M.C.（1998）肝细胞核因子4刺激上皮标记基因的表达，在去分化肝癌细胞中充当形态原。细胞生物学杂志。140, 935–946-项目管理咨询公司-公共医学

[9] Chen W.S.、Manova K.、Weinstein D.C.、Duncan S.A.、Plump A.S.、Prezioso V.R.、Bachvarova R.F.和Darnell J.E.Jr.（1994）内脏内胚层表达的HNF-4基因的破坏导致胚胎外胚层细胞死亡和小鼠胚胎原肠发育受损。基因发育8，2466–2477-公共医学

[10] Chen W.S.、Manova K.、Weinstein D.C.、Duncan S.A.、Plump A.S.、Prezioso V.R.、Bachvarova R.F.和Darnell J.E.Jr.（1994）内脏内胚层表达的HNF-4基因的破坏导致胚胎外胚层细胞死亡和小鼠胚胎原肠发育受损。基因发育8，2466–2477-公共医学

将引文保存到文件

电子邮件引文

添加到集合

添加到我的书目

您保存的搜索

为外部引文管理软件创建文件

您的RSS源

HNF4α-microRNA-194/192信号轴维持肝细胞功能

附属公司

HNF4α-microRNA-194/192信号轴维持肝细胞功能

作者

附属公司

摘要

利益冲突声明

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

分子生物学数据库

研究材料

其他

摘要

利益冲突声明

数字

类似文章

引用人

工具书类

出版物类型

MeSH术语

物质

相关信息

LinkOut-更多资源

全文源

其他文献来源

分子生物学数据库

研究材料

其他