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.1989年7月;109(1):7-15.
doi:10.1083/jcb.109.1.7。

人类HSP27基因在啮齿类动物细胞中的表达赋予其抗热休克能力

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人类HSP27基因在啮齿类动物细胞中的表达赋予其抗热休克能力

J兰德里等。 J细胞生物学. 1989年7月.

摘要

热休克诱导细胞合成称为热休克蛋白(HSPs)的特异性蛋白质,并导致热耐受的短暂状态。通过测量转染质粒pHS2711中的人HSP27基因的中国仓鼠和小鼠细胞的耐热性,直接评估了HSP27作为热应激保护分子的作用。[3H]亮氨酸和[32P]正磷酸盐标记蛋白的一元和二维凝胶电泳,结合分别特异识别仓鼠和人类HSP27蛋白的两种兔抗血清Ha27Ab和Hu27Ab的免疫学分析,用于监测转染蛋白和内源性蛋白的表达和诱导性。pHS2711中克隆的人类HSP27基因在啮齿动物细胞中组成性表达,导致人类HSP28和所有磷酸化衍生物的积累。内源性HSPs的基础表达或热诱导表达没有改变。额外HSP27蛋白的存在可在转染48小时后立即对热休克提供保护,并为稳定转染的中国仓鼠和小鼠细胞系提供永久耐热表型。转染细胞的温和热处理导致内源性热休克蛋白的全部补体的诱导和耐热性的小幅增加,但所达到的水平没有超过热诱导的耐热对照细胞。这些结果表明,HSP27水平升高足以保护机体免受热损伤。结论是,HSP27在细胞暴露于HSP诱导物后获得的热阻增加中起主要作用。

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