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比较研究
.1989年5月;133(1):235-46.
doi:10.1016/0012-1606(89)90314-x。

原位杂交显示肌肉特异性基因的时间分辨和序列表达

附属公司
比较研究

原位杂交显示肌肉特异性基因的时间分辨和序列表达

J B劳伦斯等。 求文献一篇. 1989年5月.

摘要

通过对体外分化的鸡骨骼肌成肌细胞进行原位杂交,直接分析单个细胞内肌肉特异性mRNA的表达。这些探针检测到肌聚肌球蛋白重链(MHC)或肌动蛋白的骨骼、心脏和β亚型的mRNA。获得了有关这些基因在单个细胞中表达的精确信息,并与细胞形态和相互作用、细胞周期阶段以及相应蛋白的免疫荧光检测的分析直接相关。结果表明,肌球蛋白和肌动蛋白这两种主要肌肉特异性蛋白的mRNA在细胞融合时没有同步激活。众所周知,α-心肌动蛋白(CAct)的mRNA是肌肉中主要的胚胎肌动蛋白亚型,在细胞融合之前和肌肉MHC mRNA的任何亚型表达之前表达。MHC mRNA在融合后立即迅速积累,而骨骼肌动蛋白mRNA仅在较大的肌纤维中表达。表达CAct mRNA的单个细胞具有特征性的短双极形态,位于G1末端,不包含可检测到的相应蛋白水平。在与CAct mRNA相对应的表达模式中,肌纤维和表达CAct mRNA的形态类型细胞中,β-actin mRNA的表达水平降低至低或无法检测到的水平。最后,使用异型体特异性寡核苷酸探针的非同位素检测比较不同肌动蛋白亚型的mRNA在细胞内的分布。这项工作说明了一种分析细胞分化和基因表达的普遍有价值的方法,它直接整合了单个细胞的分子、形态学、生物化学和细胞周期信息。

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