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.1989年4月;108(4):1363-73.
doi:10.1083/jcb.108.4.1363。

酵母液泡膜糖蛋白二肽氨基肽酶B的结构、生物合成和定位

附属公司

酵母液泡膜糖蛋白二肽氨基肽酶B的结构、生物合成和定位

C J罗伯茨等。 J细胞生物学. 1989年4月.

摘要

我们对酵母液泡膜蛋白二肽氨基肽酶B(DPAP B)的结构、生物发生和定位进行了表征。DPAP B特异性抗体可识别酵母中的120-kD糖蛋白,其行为类似于完整的膜蛋白,因为它不会通过高pH Na2CO3处理从膜上去除。对推导出的DPAP B氨基酸序列的检查显示,NH2末端附近有一个疏水结构域,可能跨越脂质双层。DPAP B的体外酶活性和表观分子量不受PEP4等位基因状态的影响,PEP4是许多可溶性液泡水解酶蛋白水解激活所必需的基因。DPAP B是作为糖基化前体合成的,通过添加碳水化合物将其转化为成熟的120-kD物种。DPAP B的前体形式在sec突变体中积累(Novick,P.,C.Field和R.Schekman.1980。单元格。21:205-215)在内质网(sec18)或高尔基体(sec7)处被阻断,但在分泌囊泡(sec1)处未被阻断。DPAP B在野生型或sec1突变细胞中的免疫定位表明,该蛋白存在于液泡膜中。然而,它存在于sec18和sec7细胞的非空泡隔室中,证实了这些突变体中DPAP B的传递被阻断。有趣的是,DPAP B似乎染色了sec18突变体的核膜,这与限制温度下内质网膜中DPAP B的积累一致。这些结果表明,可溶性和膜结合的液泡蛋白使用分泌途径的相同阶段进行转运。

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