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.1989年12月;109(第6部分第1):2703-20。
doi:10.1083/jcb.109.6.2703。

幼仓鼠肾细胞内吞途径的定量分析

附属机构

幼仓鼠肾细胞内吞途径的定量分析

G格里菲斯等。 J细胞生物学. 1989年12月.

摘要

利用液相标记物辣根过氧化物酶(HRP)对幼仓鼠肾脏(BHK)细胞内吞途径的细胞室进行了形态学分析。在增加内吞时间后标记的内吞结构已经被鉴定,并测量了它们的体积和表面密度。在摄取HRP的前2分钟内,标记结构的体积密度迅速增加,随后在接下来的13-18分钟内保持不变。该平台代表内体细胞器的体积密度,占细胞质体积的0.65%(或每个细胞6.8微米3)。标记结构由管状-柱状元素组成,通常与300-400nm囊泡连续观察到。内化15-20分钟后,HRP标记结构的体积密度再次迅速增加,并在标记的30-60分钟之间达到第二个平台。第二次增加与HRP的可检测水平相对应,HRP到达较晚的酸性磷酸酶(AcPase)反应区。这些结构包括前溶酶体和溶酶体,大多为囊泡状,总体积占细胞质体积的3.5%(或每个细胞37微米3)。两类细胞器(内体和前溶酶体/溶酶体)的绝对外周表面积估计分别为每细胞430和370微米2。摄入前2分钟内化的液体体积比此时标记的隔间体积小5-7倍。为了解释这些结果,我们提出,HRP从细胞表面摄取后,被传递到内体中并在内体中稀释,内体最初是不含标记物的细胞器。随着内吞次数的增加,HRP在早期内体中的浓度增加,因为更多的标记物进入该区室。在冷冻切片上直接使用抗HRP抗体和胶体金显示,早期时间点内体中HRP浓度升高。本研究中给出的体视学值与早期研究相结合,为BHK细胞中膜的总表面积和膜合成速率提供了最小估计值。

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工具书类

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