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.2015年3月至4月;33(2):250-4。
Epub 2015年4月9日。

培养的人内皮细胞中CTLA4-Ig/CD86相互作用:对VEGFR-2和ICAM1表达的影响

附属公司
  • PMID: 25896473

培养的人内皮细胞中CTLA4-Ig/CD86相互作用:对VEGFR-2和ICAM1表达的影响

毛里齐奥·库托洛等。 临床实验风湿病. 2015年3月至4月.

摘要

目标:以前的研究已经报道了内皮细胞(EC)上存在CD86(B7.2)共刺激分子,最近的数据表明,作为类风湿关节炎生物制剂的CTLA4-Ig(abatacept)与滑膜炎不同细胞上表达的CD86相互作用。因此,在培养的内皮细胞中评估了CTLA4-Ig/CD86相互作用对VEGFR-2(血管内皮生长因子受体2)和ICAM1表达的影响。

方法:通过流式细胞术(FACS)、western blot(WB)和定量实时PCR(qRT-PCR)分析经CTLA4-Ig(10、100、500μg/ml)处理的活化内皮细胞(γIFN 500 U/ml或IL-17 100 ng/ml)的CD86、VEGFR-2和ICAM1表达。

结果:在CTLA4-Ig治疗(10、100、500μg/ml;24小时)后,活化的内皮细胞在FACS处的CD86阳性率降低:分别为66、59、51%,而未经处理的细胞(cnt)(γIFN活化的细胞)为68%,而IL-17激活的内皮细胞为42、47、46%,而71%。经CTLA4-Ig处理的Gamma-IFN激活的内皮细胞仅在ICAM1荧光方面呈剂量依赖性下降。然而,在CTLA4-Ig 500μg/ml(3和24小时)后,ICAM1和VEGFR-2的WB均显著降低(p<0.05),而在CTLA4-Ig 100μg/ml后(3小时),VEGFR-1的WB也显著降低(p<0.05)。QRT-PCR显示,在CTLA4-Ig 500μg/ml(3和24小时)和CTLA4--Ig 100μg/ml后(限制在3小时),VEGFR-2显著降低(p<0.05)。ICAM1的QRT-PCR在3小时和24小时时呈阴性,可能是因为检测时间太晚了。

结论:结果支持CTLA4-Ig/CD86相互作用于γIFN和IL-17激活的内皮细胞调节,VEGFR-2和ICAM1的表达均与炎症和血管生成过程相关,提示内皮细胞是阿巴西普的进一步靶点。

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