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.2015年1月;45(1):113-22.
doi:10.1111/hepr.12324。 Epub 2014年7月4日。

Nogo-B:肝硬化的潜在指标和肝星状细胞活化的调节因子

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Nogo-B:肝硬化的潜在指标和肝星状细胞活化的调节因子

Ruoting男子等。 肝素研究. 2015年1月.

摘要

目标:评估肝硬化患者血浆Nogo-B水平,并揭示Nogo-B-调节肝星状细胞(HSC)激活的新分子基础。

方法:采用酶联免疫吸附试验检测肝硬化患者血浆Nogo-B水平。用转化生长因子(TGF)-β激活或刺激大鼠原代HSC。用Nogo-B shRNA转染活化的HSC 48 h,以抑制Nogo-B-表达。Nogo-B、α-平滑肌肌动蛋白(SMA)、I型胶原、转化生长因子-β、内质网(ER)应激关键分子的基因表达,包括C/EBP同源蛋白(CHOP)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、激活转录因子(ATF)4、ATF6、X-box结合蛋白1(Xbp-1)和钙连蛋白,以及自噬beclin 1的标记物,用定量逆转录聚合酶链反应检测。western blot检测Nogo-B、α-SMA、I型胶原、CHOP、GRP78和自噬标志物LC3B的蛋白表达。

结果:与健康对照组相比,肝硬化患者的血浆Nogo-B水平要高得多。在培养的HSC激活过程中可以诱导Nogo-B表达和ER应激。TGF-β治疗增加Nogo-B的表达,呈时间和剂量依赖性。敲低HSC中的Nogo-B降低了HSC的激活。Nogo-B基因敲除后,ER应激标记和自噬标记的表达下降。内质网应激激动剂或拮抗剂可以调节自噬水平。

结论:循环Nogo-B可能是肝硬化的有效指标。抑制Nogo-B可以减少HSC的激活,其中减轻内质网应激可能是机制之一,这提示了一种潜在的途径来干预Nogo-B-在肝纤维化中的作用。

关键词:Nogo-B;内质网应激;肝星状细胞;shRNA;转化生长因子-β。

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