Apparent endocytosis of fluorescein isothiocyanate-conjugated dextran by Saccharomyces cerevisiae reflects uptake of low molecular weight impurities, not dextran

doi:10.1083/jcb.105.5.1981

.1987年11月；105(5):1981-7.

doi:10.1083/jcb.105.5.1981。

酿酒酵母对异硫氰酸荧光素结合右旋糖酐的表观内吞反应了对低分子量杂质的吸收，而非右旋糖苷

R A普雷斯顿¹, R F墨菲, E W琼斯

附属公司

PMID： 2445758
预防性维修识别码：项目经理2114858
内政部： 10.1083/jcb.105.5.1981

酿酒酵母对异硫氰酸荧光素偶联右旋糖酐的表观内吞作用反映了对低分子量杂质的摄取，而不是右旋糖酐

R A普雷斯顿等。 J细胞生物学. 1987年11月.

.1987年11月；105(5):1981-7.

doi:10.1083/jcb.105.5.1981。

作者

R A普雷斯顿¹, R F墨菲, E W琼斯

附属

¹宾夕法尼亚州匹兹堡市卡内基梅隆大学生物科学系，邮编：15213。

PMID： 2445758
预防性维修识别码：项目经理2114858
内政部： 10.1083/jcb.105.5.1981

摘要

与Riezman的报告（Riezma，H.1985，Cell.40:1001-1009）一致，小分子Lucifer黄色的液相内吞作用发生在酵母Saccharomyces cerevisiae，Makarow（Makarouw，M.1985）中。EMBO[Eur.Mol.Biol.Organ.]J.4:1861-1866）报道了70-kD FITC-右旋糖酐（FD）的内吞摄取及其随后的分隔进入酵母液泡。在此合成和纯化的FD样品未能在允许使用商业FD标记的条件下标记酵母液泡。色谱分析表明，商业FD受到至少三种低分子量荧光化合物的严重污染。透析对去除污染物无效。纯化后（Sephadex G25，乙醇提取），商业FD无法标记液泡。根据葡聚糖凝胶和薄层色谱法，标记有部分纯化FD的细胞提取物含有FITC，而不是FD。无论是否存在未标记的70-kD右旋糖酐，真正的FITC（10微克/毫升）都是一种有效的液泡标记剂。FITC摄取的快速动力学（在pH 5.5下每10（6）个细胞0.28pmol/min）和pH依赖性表明，FITC摄取的机制涉及扩散而非内吞。鉴于这些结果，应谨慎解释使用未净化商业FD的标记实验。

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