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2013年4月12日;1(1):12.
doi:10.1186/2049-2618-1-12。

阴道微生物群的meta-RNA-seq比较及内乳杆菌在健康和失调中的差异表达

附属公司

阴道微生物群的meta-RNA-seq比较及内乳杆菌在健康和失调中的差异表达

让·M·马克莱姆等。 微生物组

摘要

背景:细菌性阴道病(BV)是育龄妇女最常见的阴道疾病,与高度多样性和异质性的微生物群有关。在这里,我们提出了一种原理验证分析,以利用meta-RNA-seq揭示微生物群落的功能,从而揭示可能将健康阴道微生物群落与处于细菌性阴道病(BV)病态的微生物群落区分开来的基因和途径。

结果:在这两种条件下都存在优势生物体内乳杆菌,并且在BV中的表达谱与健康相比有所不同。尽管其基因组最少,但内脏乳杆菌的差异表达量超过其基因补体的10%。值得注意的是,在BV环境中,肠杆菌增加了胆固醇依赖性细胞溶血素、粘蛋白和甘油转运以及相关代谢酶的表达。属于CRISPR系统的基因被大幅上调,表明噬菌体影响了群落。细菌群落作为一个整体,在BV条件下表现出对糖原和甘油作为碳源的偏好,这反映了乳杆菌的特性。BV条件下预测的代谢最终产物包括丰富的琥珀酸和其他短链脂肪酸,而健康条件下预计主要含有乳酸。

结论:我们的研究强调了在研究人类微生物群时,除了描述种群结构外,了解细菌群落功能活动的重要性。

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数字

图1
图1
细菌群落结构和功能。(A类)每个样本中每个分类单元的所有映射mRNA读数的分布。被认为健康的两个样品(N4和N30)主要由crispatus乳杆菌组成,检测到少量的乳杆菌和詹森乳杆菌。细菌性阴道病(BV)的两个样本中,乳酸杆菌的相对比例较低,阿姆尼普氏菌、阴道加德纳菌、巨球菌和其他厌氧生物的比例较大。(B类)选定的子系统2和子系统3类别显示了N或BV条件下丰富的子系统4功能。每个点代表一个特定的子系统4函数,表达式的变化幅度绘制在相对于BV条件的x轴上。如果条件之间存在显著差异,则点为蓝色(非BV)或红色(BV),而灰色点在条件之间没有差异。(C类)代表BV中部分分类单元对功能的贡献显著上调(B中的红点)。成对的条表示两个样本(B27和B31),每种颜色都是特定分类单元对该功能的读取分数。丁酸激酶是乙酰-CoA发酵生成丁酸子系统的一部分,重点介绍了1B中的差异功能与1C中功能的分类组成之间的关系。甘氨酸、甘油;甘氨酸-3P,甘油-3-磷酸;GL,甘油脂质;GPL,甘油磷脂。
图2
图2
惰性乳杆菌泛转录组RNA-seq数据的循环表示。通过核苷酸身份对冗余编码序列进行聚类后,RNA-seq读取被映射到12个可用的内切酶基因组(列在附加文件1:表S4中)(参见方法)。圆圈中的断裂将相邻编码序列(CDS)的块分开,这些序列是通过基因组集合上的支架排序的(环1)。图的高度表示CDS发生的12个基因组中的多少个。第一个相邻的区块(深蓝色)是所有基因组中存在的954个CDS,被认为是核心的L.iners基因集。环2显示每个CDS的直系群(COG)色码功能簇。环3非细菌性阴道病(BV)和BV样本中每个CDS的差异表达。条形图的绝对高度显示了表达式中的折叠变化(log2)(向上BV为正,向上非BV为负)。如果差异显著,则条带颜色(BV为红色,非BV为蓝色)。感兴趣的区域标记在圆的中心。环4和环5分别显示了BV和非BV样本中CDS表达中值的热图表示。较深的蓝色代表较高的表达。结果中记录的感兴趣区域用字母三角形标记。
图3
图3
基于RNA-seq分析的阴道微生物群预测差异功能概述。健康条件下存在的主要乳酸杆菌导致了一个相对简单的环境,其中碳水化合物转化为乳酸。这导致pH值低,并抑制其他厌氧生物的生长。细菌性阴道病(BV)中更复杂的微生物组成导致细胞溶解增加,碳水化合物可用性增加。在这种情况下,碳水化合物转化为琥珀酸和其他短链脂肪酸(SCFA),可以调节宿主免疫,增加pH值并增加还原环境。伴随而来的是噬菌体负载量的增加,以及一些生物体合作产生在某些BV病例中发现的恶臭化合物的可能性。

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