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.2013年12月15日;126(第24部分):5553-65。
doi:10.1242/jcs.128868。 Epub 2013年10月8日。

ESCRT在胞外体生物发生、组成和分泌中的功能分析突出了胞外小泡的异质性

附属公司

ESCRT在胞外体生物发生、组成和分泌中的功能分析突出了胞外小泡的异质性

玛丽娜·科伦坡等。 细胞科学杂志. .

摘要

外泌体是内胚体多泡体(MVB)与质膜融合后分泌的细胞外囊泡(EV)。尽管它们可以用于调节外体的形成,因此是理解外体功能的一个很有希望的工具,但其生物发生机制尚未完全确定。我们对表达MHC II类(MHC II)的HeLa-CIITA细胞中运输(ESCRT)机制所需的内体分选复合体的23个成分和相关蛋白进行了RNA干扰筛选。沉默HRS、STAM1或TSG101可减少EV相关CD63和MHC II的分泌,但每个基因对分泌EV的大小和/或蛋白质组成的改变不同,如免疫电镜所示。相比之下,VPS4B的缺失增加了这种分泌,但没有改变EV的特征。对于其他几个ESCRT亚单位,从筛选结果中不可能得出它们参与外体生物发生的任何结论。有趣的是,ALIX沉默增加了MHC II外体分泌,这是细胞内MHC II蛋白和mRNA水平总体增加的结果。在人类树突状细胞(DC)中,ALIX缺失也增加了细胞中的MHC II,但在释放的CD63阳性EV中没有增加。这种差异可能是由于与HeLa-CIITA相比,DC中回收的囊泡的大小差异更大,MHC II更高,CD63水平更低。结果揭示了选择性ESCRT组分和辅助蛋白在HeLa-CIITA外显子分泌和组成中的作用。他们还强调了肿瘤细胞系和原发性DC分泌的囊泡的生物遗传差异。

关键词:ALIX公司;ESCRT;外显子;胞外小泡;MHC II级。

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