Downregulation of L-type amino acid transporter 1 expression inhibits the growth, migration and invasion of gastric cancer cells

doi:10.3892/ol.2013.1342

.2013年7月；6(1):106-112.

doi:10.3892/ol.2013.1342。 Epub 2013年5月8日。

L型氨基酸转运蛋白1表达下调抑制胃癌细胞的生长、迁移和侵袭

两会市¹, 罗文平, 黄文兵, 黄石穗, 黄光艳

附属公司

PMID： 23946786
预防性维修识别码：下午3742819
内政部： 10.3892/ol.2013.1342

L型氨基酸转运蛋白1表达下调抑制胃癌细胞的生长、迁移和侵袭

两会市等。肿瘤Lett. 2013年7月.

.2013年7月；6(1):106-112.

doi:10.3892/ol.2013.1342。 Epub 2013年5月8日。

作者

石良辉¹, 罗文平, 黄文兵, 黄石穗, 黄光艳

附属

¹皖南医学院第一附属医院外科，安徽芜湖241001；

PMID： 23946786
预防性维修识别码：项目经理3742819
内政部： 10.3892/ol.2013.1342

摘要

胃癌是全球第二大癌症相关死亡原因。识别在胃癌发展中起关键作用的分子，并阐明其机制，将有助于开发新型分子靶向治疗药物。最近，大（L）型氨基酸转运体1（LAT1）是一种糖蛋白，与CD98hc相关时通过细胞膜运输氨基酸，已被证明在各种类型的癌症中过度表达，并调节多种生物过程，包括细胞生长、迁移和侵袭。然而，LAT1在胃癌中的作用尚不清楚。在本研究中，为了阐明LAT1在胃癌中的作用，通过转染插入短（sh）RNA的构建物建立了LAT1敲除的稳定胃癌细胞系。与相应的对照细胞相比，在建立的LAT1沉默的SGC7901细胞中观察到LAT1表达的显著降低；然而，其伴侣CD98hc的表达水平没有改变。此外，下调LAT1表达抑制胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭。此外，LAT1的表达减少导致G细胞周期阻滞₁/M相。这些发现提示LAT1可能在胃癌的进展和转移中起重要作用，并可能成为肿瘤治疗的靶点。

关键词：L型氨基酸转运蛋白1；胃癌；入侵；迁移；增殖。

PubMed免责声明

数字

**图1。**
大（L）型氨基酸转运蛋白1（LAT1）短（sh）RNA的插入序列经（A）酶消化法和（B）DNA测序证实。（A）将插入shRNA1和shRNA2的pGPU6/GFP/Neo构建物用*Pst（磅/平方英尺）*我或巴姆HI，用1.5%琼脂糖凝胶分离DNA片段。（B）插入shRNA1和shRNA2的序列。

**图2。**
荧光显微镜下建立的SGC7901细胞中绿色荧光蛋白的表达。放大倍数，×200。

**图3。**
大（L）型氨基酸转运蛋白1（LAT1）和CD98hc在已建立的SGC7901细胞中的表达。从SGC7901_blank、SGC7901-shNC、SGC79 01_shRNA1和SGC7901 _shRNA2细胞中提取总mRNA，并进行RT-PCR分析。（A） RT-PCR产物在1.5%琼脂糖凝胶中分离。（B）（A）中DNA片段的量化。（C）从上述四个细胞系中纯化全细胞蛋白裂解物并进行western blot分析。（D）（C）中蛋白质带的定量。列，表示；巴，标准偏差。*与空白相比，P<0.05。三个独立实验的代表。M、标记；B、 SGC7901_空白；shNC，SGC7901_shNC；shR1、SGC7901_shRNA1；shR2，SGC7901_shRNA2。

**图4。**
大（L）型氨基酸转运蛋白1（LAT1）表达的敲除抑制胃癌的细胞增殖并诱导细胞周期停滞。（A）将SGC7901_blank、SGC7901-shNC和SGC7901 _shRNA2细胞接种在96周板中，并进行3天的MTT分析。点、手段；bars，SD。（B）细胞系接种在6孔板中，进行流式细胞术，并通过CellQuest软件进行分析。（C）细胞周期每个阶段的量化。列，表示；巴，标准偏差。*与空白相比，P<0.05。空白，SGC7901_Blank；shNC，SGC7901_shNC；shRNA2，SGC7901_shRNA2。

**图5。**
敲低大（L）型氨基酸转运体1（LAT1）的表达抑制胃癌细胞的迁移和侵袭。（A）膜上迁移细胞的代表区域。（B）三次测量的迁移细胞的平均数量。（C）膜上浸润细胞的代表区域。（D）三次测量的侵入细胞平均数。列，表示；巴，标准偏差。*与空白相比，P<0.05。空白，SGC7901_Blank；shNC，SGC7901_shNC；shRNA2，SGC7901_shRNA2。

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