Transcranial two-photon imaging of synaptic structures in the cortex of awake head-restrained mice

doi:10.1007/978-1-62703-411-1_3

.2013:1010:35-43.

doi:10.1007/978-1-62703-411-1-3。

清醒头枕紧张小鼠大脑皮层突触结构的经颅双光子成像

广阳¹, 冯·潘, 保罗·C·张, 弗兰克·古登, 文彪干

附属公司

PMID： 23754217
预防性维修识别码： PMC3987700型
内政部： 10.1007/978-1-62703-411-1_3

清醒头枕紧张小鼠大脑皮层突触结构的经颅双光子成像

广阳等。分子生物学方法. 2013.

.2013:1010:35-43.

doi:10.1007/978-1-62703-411-1-3。

作者

广阳¹, 冯·潘, 保罗·C·张, 弗兰克·古登, 文彪干

附属

¹美国纽约州纽约市纽约大学医学院麻醉学系。

PMID： 23754217
预防性维修识别码：下午3987700
内政部： 10.1007/978-1-62703-411-1_3

摘要

经颅多普勒双光子显微镜可以对活动物完整皮层中的神经元、胶质细胞和血管系统进行长期成像。到目前为止，这项技术主要用于获取麻醉动物的图像。在这里，我们描述了清醒的头枕紧张小鼠皮层神经元结构的高分辨率双光子成像的详细方案。在麻醉小鼠中，手术在1小时内完成。动物从麻醉中恢复后，可以在几分钟到几天内多次进行双光子成像，从而可以对突触可塑性和病理进行纵向研究，而不会出现麻醉试剂引起的并发症。

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数字

图1
头部受限清醒动物制剂示意图。颅骨支架包括两条平行的钢筋，用氰基丙烯酸酯胶和牙科粘接剂牢牢固定在颅骨上。感兴趣的大脑区域位于中央，颅骨的圆形区域（通常直径约0.5–1 mm）变薄至约20μm。在成像过程中，将颅骨固定器拧紧到颅骨固定板的钢块上，以减少运动伪影

图2
清醒头枕动物精细神经元结构的重复经颅TPLSM成像。(一)头枕紧张、清醒的动物准备中薄薄的颅骨颅骨窗口的CCD摄像头视图。通过变薄的颅骨可以清楚地看到皮层血管系统，并将其作为一个里程碑，在随后的时间点重新定位成像区域。(b条)1个月大时清醒动物初级体感皮层中相同树突状节段在4和8小时内的体内延时成像（改编自参考文献22）。大多数树突棘在8小时内保持稳定，而树突丝状体(星号)经历了快速的更替。显示了包含感兴趣树突段的三维图像堆栈的二维投影。比例尺：500μm(一)，2微米(b条)

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