跳到主页内容
美国国旗

美国政府的官方网站

Dot政府

gov意味着它是官方的。
联邦政府网站通常以.gov或.mil结尾。之前分享敏感信息，确保你在联邦政府政府网站。

Https系统

该站点是安全的。
这个https（https）：//确保您连接到官方网站，并且您提供的任何信息都是加密的并安全传输。

访问密钥 NCBI主页 MyNCBI主页 主要内容 主导航
.2013年11月；58(5):1801-13.
doi:10.1002/hep.26511。 Epub 2013年9月30日。

Notch和Hedgehog之间的交叉对话调节小鼠肝星状细胞的命运

谢冠华 1, 游戏卡拉卡, Marzena Swiderska-Syn公司, 格雷戈里·米歇洛蒂, 莱恩迪·克鲁格, 陈玉平, 理查德·特普雷蒙特, 史蒂夫·S·崔, 安娜·梅·迪尔
附属公司

Notch和Hedgehog之间的交叉对话调节小鼠肝星状细胞的命运

谢冠华等。 肝病学. 2013年11月.

摘要

肝脏修复涉及肝星状细胞（HSC）的表型变化和调控上皮-间充质/间充质-上皮转换的形态发生信号通路的重新激活，如Notch和Hedgehog（Hh）。Hh刺激HSC成为肌成纤维细胞（MFs）。最近对肝脏受损的成年小鼠进行的血统追踪研究表明，一些MF成为多能祖细胞，以再生肝细胞、胆管细胞和HSC。我们研究了原代HSC培养物和两种不同的纤维化动物模型，以评估以下假设：激活HSC中的Notch通路，通过一种涉及上皮-间质样转变的机制，刺激HSC成为（并保持）MFs，并需要与典型的Hh通路相互对话。我们发现，当培养的HSC转变为MFs时，它们激活Hh信号，经历上皮-间质样转变，并增加Notch信号。MFs/HSC中阻断Notch信号抑制Hh活性并导致间质-上皮样转变。抑制Hh通路可抑制Notch信号传导，并诱导间质-上皮样转变。在小鼠多能干祖细胞系中操纵Hh和Notch信号可引起类似反应。在小鼠中，肝损伤增加了MF和Hh-反应MF子代（即HSC和导管细胞）的Notch活性。有条件地干扰胆管阻塞小鼠MF中的Hh信号抑制Notch信号并阻断MF和导管细胞的积聚。

结论：Notch和Hedgehog通路相互作用，通过调节上皮-间充质样/间充质-上皮样转变，控制参与成人肝脏修复的关键细胞类型的命运。

PubMed免责声明

数字

图1
图1。肝损伤增加Desmin表达基质细胞的Notch信号
（A） 假手术或BDL手术后14天WT小鼠肝脏总mRNA的qRT-PCR分析，以检测Notch通路基因的表达*p<0.05与sham，n=4。（B） BDL小鼠肝脏中Notch-2、Jagged-1或Hey2（棕色）与Desmin（绿色）的双重免疫组化显示这些标记物的共同定位（插图）。在10个随机选择的字段中，还量化了Desmin+细胞中双阳性细胞的百分比*p<0.001与sham，n=3只小鼠/组。（C） 假手术或BDL手术后14天从WT小鼠分离的HSC的FACS分析ASMA、Notch-2、Jagged-1或Hey2的表达。Desmin被用作HSC的标记物。（D） 高脂饮食/CCl处理14天的WT小鼠肝脏总mRNA的qRT-PCR分析4.*p<0.05，**p<0.01与高脂肪饮食控制相比，n=3。（E） 高脂饮食/CCl中Notch-2、Jagged-1或Hey2（棕色）和Desmin（绿色）的双重免疫组化4小鼠肝脏显示这些标记物的共同定位（插入）。放大倍数×40。在10个随机选择的字段中，还量化了Desmin+细胞中双阳性细胞的百分比*p<0.001与.HF控制，n=3只小鼠/组。
图1
图1。肝损伤增加表达Desmin的基质细胞中的Notch信号传导
（A） 假手术或BDL手术后14天WT小鼠肝脏总mRNA的qRT-PCR分析，以检测Notch通路基因的表达*p<0.05与sham，n=4。（B） BDL小鼠肝脏中Notch-2、Jagged-1或Hey2（棕色）与Desmin（绿色）的双重免疫组化显示这些标记物的共同定位（插图）。在10个随机选择的字段中，还量化了Desmin+细胞中双阳性细胞的百分比*p<0.001与sham，n=3只小鼠/组。（C） 假手术或BDL手术后14天从WT小鼠分离的HSC的FACS分析ASMA、Notch-2、Jagged-1或Hey2的表达。Desmin被用作HSC的标记物。（D） 高脂饮食/CCl处理14天的WT小鼠肝脏总mRNA的qRT-PCR分析4.*p<0.05，**p<0.01与高脂肪饮食控制相比，n=3。（E） 高脂饮食/CCl中Notch-2、Jagged-1或Hey2（棕色）和Desmin（绿色）的双重免疫组化4小鼠肝脏显示这些标记物的共同定位（插入）。放大倍数×40。在10个随机选择的字段中，还量化了Desmin+细胞中双阳性细胞的百分比*p<0.001与.HF控制，n=3只小鼠/组。
图2
图2。原发性HSC转分化过程中Notch信号被激活
（A） 静止（新鲜分离，第0天）和肌纤维母细胞（培养第7天）HSC的FACS分析。结蛋白和α-平滑肌肌动蛋白（ASMA）分别用作静止或肌纤维母细胞性HSC的标记物。（B） 静态和肌纤维母细胞性HSC中Notch抑制剂（Numb）、受体（Notch-1和Notch-2）、配体（Jagged-1）和靶基因（Hes1、Hey1、Hey2和c-Myc）的qRT-PCR分析。结果与导管祖细胞（603B）中的基因表达进行比较，*p<0.05，**p<0.01，***p<0.001，n=3。
图3
图3。Notch-responsive肝祖细胞（603B）共同表达导管、肝细胞、HSC和间充质标志物
（A） FACS分析证实603B是具有活跃Notch信号的小鼠导管祖细胞。灰色线表示同型对照。（B） 603B的FACS分析显示，其他导管标记物（Krt7和HNF6）也有表达，但肝细胞标记物（HNF4α、AFP和白蛋白）、Hh信号因子/靶基因（Ptc、Gli1和Gli2）、间充质标记物（Vimentin和ASMA）和HSC相关标记物（Desmin和GFAP）也有表达（C）通过qRT-PCR分析比较603B与原代小鼠肝细胞（mHep）和新鲜分离或培养激活的原代小鼠HSC（分别为d0 mHSC和d7 mHSC）的基因表达，n=3/组。#表示无法检测的信号。
图4
图4。抑制Notch信号抑制Hedgehog信号并促进导管型祖细胞的间质-上皮样转变和肝细胞分化
用DAPT（γ-分泌酶抑制剂）处理603B 48小时后的qRT-PCR分析（a）Notch通路基因、（B）上皮/静止基因和（C）肌成纤维细胞（MF）/刺猬（Hh）基因的变化*p<0.05与二甲基亚砜对照，n=3。
图5
图5。Notch抑制抑制Hedgehog信号传导并促进原发性HSC间质-上皮样转变
用DAPT治疗3天的原发MF-HSC的qRT-PCR分析（A）Notch基因、（B）MF/Hh靶基因、（C）上皮/静止基因和（D）前体基因的变化，*p<0.05与DMSO控制，n=3。（E） DAPT处理的MF-HSC染色，以检测裂解的Notch-2、Jagged-1和Hey2蛋白。比例尺：150μM。（F） 检测DAPT对ASMA HSC表达、增殖（Ki67）和脂质含量（油红O）的影响。
图6
图6。阻断肌纤维母细胞肝细胞的Hedgehog信号抑制Notch信号
（A） 对用Hh抑制剂GDC-0449或DMSO处理48小时的603B进行qRT-PCR分析，以了解Hh靶基因（Ptc和Gli1）、Notch基因（Notch-2、Jagged-1、Hey1和Hey2）和上皮基因（AFP和HNF4α）的变化*p<0.05与DMSO控制，n=3。（B） GDC-0449处理3天的原发MF-HSC的qRT-PCR分析*p<0.05，**p<0.01与.DMSO控制。（C–E）ASMA-Cre-ERT2段–Smo-flox（双转基因，DTG）小鼠接受BDL，并从BDL后第4天到第10天每隔一天用载体（VEH，橄榄油，n=3）或三苯氧胺（TMX，n=4）治疗。（C） 肝总信使核糖核酸的qRT-PCR分析，*p＜0.05。（D） Notch-2和Hey2的代表性免疫组织化学和量化。比例尺：100μm*p<0.05，**p<0.01。（E）图5D所示肝脏切片中Notch-2或Hey2（棕色）与Desmin（绿色）双重染色。还量化了Desmin+细胞中Notch-2/Desmin或Hey2/Desmin双阳性细胞的百分比。每只老鼠至少有10个字段*p<0.05，n=3。
请参阅PMC中的此图像和版权信息

类似文章

  • 平滑是成人肝脏修复的主要调节器。
    Michelotti GA、Xie G、Swiderska M、Choi SS、Karaca G、Krüger L、Premont R、Yang L、Syn WK、Metzger D、Diehl AM。 Michelotti GA等人。 临床投资杂志。2013年6月；123(6):2380-94. doi:10.1172/JCI66904。 临床投资杂志。2013. PMID：23563311 免费PMC文章。
  • 刺猬通过调节代谢来控制肝星状细胞的命运。
    Chen Y、Choi SS、Michelotti GA、Chan IS、Swiderska-Syn M、Karaca GF、Xie G、Moylan CA、Garibaldi F、Premont R、Suliman HB、Piantadosi CA、Diehl AM。 陈毅等。 胃肠病学。2012年11月；143（5）：1319-1329.e11。doi:10.1053/j.gastro.2012.07.115。Epub 2012年8月8日。 胃肠病学。2012 PMID：22885334 免费PMC文章。
  • 瘦素通过激活hedgehog通路促进肝星状细胞的肌纤维母细胞表型。
    Choi SS、Syn WK、Karaca GF、Omenetti A、Moylan CA、Witek RP、Agboola KM、Jung Y、Michelotti GA、Diehl AM。 Choi SS等人。 生物化学杂志。2010年11月19日；285(47):36551-60. doi:10.1074/jbc。M110.168542。Epub 2010年9月14日。 生物化学杂志。2010 PMID：20843817 免费PMC文章。
  • 刺猬在肝脏发出信号。
    Omenetti A、Choi S、Michelotti G、Diehl AM。 Omenetti A等人。 肝素杂志。2011年2月；54(2):366-73. doi:10.1016/j.jhep.2010.10.03。Epub 2010年10月14日。 肝素杂志。2011 PMID：21093090 免费PMC文章。 审查。
  • 肝纤维化中的微RNA：关注与刺猬信号的相互作用。
    Hyun J、Jung Y。 Hyun J等人。 世界胃肠病杂志。2016年8月7日；22(29):6652-62. doi:10.3748/wjg.v22.i29.6652。 世界胃肠病杂志。2016 PMID：27547008 免费PMC文章。 审查。
查看所有类似文章

引用人

查看所有“引用者”文章

工具书类

    1. Roskams T.星状细胞活化、祖细胞和肝再生之间的关系。临床肝病。2008;12:853–860. 九、。-公共医学
    1. Boulter L等。巨噬细胞衍生的Wnt对抗Notch信号传导，以确定慢性肝病中肝祖细胞的命运。《国家医学》2012；18:572–579.-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Tsukamoto H等。慢性肝病中的形态因子和肝星状细胞命运调控。胃肠病学肝病杂志。2012;27（补充2）：94–98。-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Kim PG等。涉及Hedgehog、Notch和Scl的信号转轴促进胚胎内皮细胞向造血细胞的转变。美国国家科学院院刊2013；110:E141–150。-项目管理咨询公司-公共医学
    1. Huang P等。脊髓中的命运规范需要Notch和Hedgehog信号的衰减。公共科学图书馆-遗传学。2012;8:e1002762。-项目管理咨询公司-公共医学

出版物类型