摘要
外泌体是一种直径为40-100nm的细胞外小囊泡,起源于晚期内体,可介导RNA和蛋白质的细胞间转移,以协助转移前生态位的形成。利用原代(SW480)和转移性(SW620)人类等基因结直肠癌细胞系,我们比较了胞外体蛋白谱,以获得对肿瘤进展基本的转移因子和信号分子的有价值的见解。使用OptiPrep™密度梯度分馏纯化的外显体直径为40-100 nm,具有约1.09 g/mL的浮力密度,并显示定型外显体标记TSG101、Alix和CD63。一项主要发现是转移性SW620细胞外泌体中转移因子(MET、S100A8、S100A09、TNC)、信号转导分子(EFNB2、JAG1、SRC、TNIK)以及脂筏和脂筏相关成分(CAV1、FLOT1、FLOT2、PROM1)的选择性富集。此外,利用低温电子显微镜,鉴定了外泌体中的超微结构成分。本研究的一个关键发现是在结直肠癌细胞外泌体中检测和共定位蛋白复合物EPCAM-CLDN7和TNIK-RAP2A。转移性结肠癌细胞源性外泌体中转移因子和信号通路成分的选择性富集有助于我们了解肿瘤微环境中肿瘤和基质细胞之间的相互作用。
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