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.2013年6月;94(第6部分):1189-1194。
doi:10.1099/vir.0.048579-0。 Epub 2013年2月20日。

新城疫病毒融合和血凝素-神经氨酸酶蛋白对其巨噬细胞宿主范围有贡献

附属公司

新城疫病毒融合和血凝素-神经氨酸酶蛋白对其巨噬细胞宿主范围有贡献

英格丽德·科纳克斯等。 J Gen Virol公司. 2013年6月.

摘要

新城疫病毒(NDV)的融合蛋白(F)和血凝素神经氨酸酶(HN)是一种多功能蛋白,在感染过程中发挥着关键作用。在这里,我们评估了NDV在巨噬细胞中复制的能力,并研究了F和HN蛋白对这些细胞中NDV感染/复制的贡献。我们的研究结果表明,虽然NDV株CA02在成纤维细胞系(DF1)或原代非粘附脾细胞中表现出类似的复制动力学,但在巨噬细胞(HD11和原代粘附脾细胞)中的复制效果优于NDV株Anhinga/93。值得注意的是,NDV CA02的相应基因交换NDV Anhinga/93的HN或F和HN基因,显著提高了嵌合病毒在巨噬细胞中复制的能力。这些结果表明,F和HN蛋白是NDV巨噬细胞宿主范围的决定因素。这代表了巨噬细胞中生产性新冠病毒感染的首次描述。

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数字

图1。
图1。
NDV毒株CA02、ZJ1、Peru/08、Anhinga/93(Anh)、Nevada/05(Nev/05)和TX4156的复制动力学。(a)DF1鸡成纤维细胞系和(b)HD11鸡巨噬细胞细胞系的多阶段生长曲线。用每种病毒(m.o.i=0.01)接种细胞(a、b),并在指定的时间点采集上清液(200µl)。病毒滴度通过限制稀释度测定,根据Spearman和Karber方法计算并表示为log10(TCID)50毫升−1). 结果显示为平均值±东南方三个独立实验的结果。
图2。
图2。
NDV株CA02和Anhinga/93在原代脾细胞中的复制动力学。NDV株CA02和Anhinga/93(Anh)在(a)原代淋巴细胞培养物(非粘附脾细胞)、(b)原代巨噬细胞培养物(附着脾细胞)和(c)原代脾细胞培养物(总脾细胞)中的多阶段生长曲线。用每种病毒(m.o.i=0.01)接种细胞(a、b、c),并在p.i第2、12、24和48小时收获。病毒滴度通过菌斑试验测定,并用p.f.u.ml表示−1.结果为平均值±东南方三个独立实验的结果*P(P)<0.02.
图3。
图3。
NDV株CA02、rAnh和嵌合病毒rAnh/CA-HN和rAnh/CA-FHN的复制动力学。(a) 鸡成纤维细胞的多阶段生长曲线(DF1;m.o.i=0.01)。用每种病毒接种细胞,并在p.i第2、12、24、36、48和72小时收获细胞。病毒滴度通过菌斑试验测定,并表示为p.f.u.ml−1(b)鸡巨噬细胞的多阶段生长曲线(HD11;m.o.i=0.01)。用每种病毒接种细胞,并在p.i第2、24、36、48和72小时收获。病毒滴度通过菌斑试验测定,并用p.f.u.ml表示−1. *P(P)≤0.05 CA02,rAnh/CA-HN和rAnh/CA-FHN vs rAnh。结果显示为平均值±东南方两次(每次2小时和72小时)或三次独立实验。
图4。
图4。
NDV株CA02、rAnh和嵌合病毒rAnh/CA-HN和rAnh/CA-FHN在原代脾细胞中的复制动力学。鸡(a)淋巴细胞(非粘附性脾细胞)和(b)巨噬细胞(粘附性脾淋巴细胞)的多阶段生长曲线。用每种病毒(m.o.i.=0.01)接种细胞,并在p.i的2、12、24和48小时收获。通过噬菌斑分析测定病毒滴度,并以p.f.u.ml表示−1. *P(P)≤0.05 CA02,rAnh/CA-HN和rAnh/CA-FHN vs rAnh。结果显示为平均值±东南方三个独立实验的结果。

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