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.2013年1月7:11:6。
doi:10.1186/1479-5876-11-6。

趋化因子CXCL14与结直肠癌根治术后患者预后相关

附属公司

趋化因子CXCL14与结直肠癌根治术后患者预后相关

曾军等。 转化医学杂志. .

摘要

背景:据报道,趋化因子CXCL14在许多恶性肿瘤(如乳腺癌和甲状腺乳头状癌)的进展中起着重要作用,但其在结直肠癌(CRC)中的作用尚待确定。本研究旨在探讨CXCL14在大肠癌进展中的表达模式及其意义。

方法:收集265例结直肠癌标本和129例匹配的邻近正常大肠粘膜标本。免疫染色检测临床标本中CXCL14的表达。采用MTT法、BrdU掺入法和集落形成法检测CXCL14对大肠癌细胞增殖的影响。分别采用transwell实验和Matrigel侵袭实验检测CXCL14对大肠癌细胞迁移和侵袭的影响。

结果:与邻近的非肿瘤粘膜组织相比,肿瘤组织中CXCL14的表达显著上调(P<0.001)。肿瘤CXCL14表达水平与TNM分期、组织分化和肿瘤大小显著相关。在多变量Cox回归分析中,来自I/II期患者的肿瘤标本(n=91)中CXCL14的高表达与疾病复发风险增加相关(风险比,2.92;95%CI,1.15-7.40;P=0.024)。III/IV期患者肿瘤标本中CXCL14表达升高(n=135)与总体生存率较差相关(风险比,3.087;95%CI,1.866-5.107;P<0.001)。功能研究表明,CXCL14在SW620结直肠癌细胞中的强制表达导致更具攻击性的表型。相反,敲低CXCL14表达可以减轻HCT116结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭潜能。

结论:综上所述,CXCL14可能是预测疾病复发和总生存率的潜在新预后因素,也可能是CRC患者术后辅助治疗的潜在靶点。

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数字

图1
图1
A、,CXCL14在人类结直肠癌中表达升高。单个FFPE切片(如病例1)显示正常结肠粘膜,邻近的结直肠癌侵犯了正常粘膜下方。插入左侧面板正常粘膜和邻近肿瘤之间的连接处,高倍镜下显示右侧面板显示了CXCL14表达水平的差异。”T’表示肿瘤组织,N’表示来自同一患者的相邻非肿瘤组织。棒材,100μm。来自相同患者(例如病例2)的正常结肠直肠组织和结肠直肠肿瘤组织的配对样本在正常结肠直肠粘膜中显示出很少可检测到的CXCL14免疫反应性。相反,大肠肿瘤的细胞质中显示出强烈的CXCL14免疫染色。棒材,50μm。B类使用免疫组织化学评分绘制每个癌和邻近正常组织中CXCL14的表达。C类,CXCL14表达得分显示为方框图,水平线代表中位数;代表25个框的底部和顶部第个和75第个百分位数;以及表示数据范围的垂直条。
图2
图2
CXCL14的表达水平与TNM分期和组织分化程度显著相关。A、,与早期CRC相比,晚期CRC更容易出现强烈的免疫反应(P(P) < 0.001). 棒材,50μm。B、,低分化大肠肿瘤的CXCL14免疫反应性强于中分化和高分化大肠肿瘤(P(P) = 0.002). 棒材,25μm。C类D、,根据TNM分期比较CXCL14免疫组化评分(C类)和组织分化(D类).
图3
图3
累积性疾病-CXCL14高或低表达的CRC患者的自由和总体生存率。A类B、,Kaplan-Meier无病生存曲线评估AJCCⅠ/Ⅱ期CRC患者的生存率(A类)和AJCC II期CRC患者(B类).C类D、,Kaplan-Meier总生存曲线评估AJCC III/IV期CRC患者的生存率(C类)和AJCC III期CRC患者(D类). 比较CXCL14高表达组和CXCL14低表达组。图形线上的标记表示经过审查的样本。P(P)值是指双边对数秩检验。
图4
图4
CXCL14表达对人结直肠癌细胞增殖的影响。A、,使用CXCL14和Ki67抗体对人类大肠肿瘤切片进行免疫组织化学染色。棒材,25μm。B、,CXCL14和Ki67表达水平的相关性(n=118;P(P) < 0.01,双尾斯皮尔曼检验系数:0.502)。C、,采用半定量RT-PCR和Western blotting检测了几种结直肠癌细胞系内源性CXCL14 mRNA和蛋白水平。D、,CXCL14在SW620亚克隆(克隆1和克隆2)中稳定过表达。E类-G中,用BrdU掺入法比较稳定表达CXCL14或模拟载体的SW620细胞的增殖(E类),MTT分析(F类)和菌落形成分析(G公司)分别是。H、,shCXCL14转染HCT116细胞可抑制CXCL14的表达。-K、,BrdU法检测shCXCL14或shNC转染HCT116细胞的增殖(),MTT分析(J型)和菌落形成分析(K(K))分别是。误差线代表±标准偏差。学生t吨测试用于统计分析,P<0.05;**,P<0.01。
图5
图5
CXCL14促进SW620细胞的迁移和侵袭。A、,CXCL14对浸润较深的癌细胞的染色比粘膜区的癌细胞更为强烈C肌肉“指环状肌肉;”L肌肉是指纵肌。淋巴结转移癌细胞也呈CXCL14免疫阳性。B类-D、,采用双室实验评价SW620亚克隆的迁移/侵袭能力。CXCL14的过度表达显著增加了迁移和入侵能力。迁移的数量(C类)并被入侵(D类)对来自五个随机区域的细胞进行计数,并显示细胞数。E类-G、,转染shCXCL14和shNC的HCT116的运动性通过跨阱实验进行比较(F类)和Matrigel分析(G公司)分别是。柱,平均值;bar,SE(一式三份)。学生的t吨测试用于统计分析,P<0.05;**,P<0.01。

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