摘要
我们评估了几种(13)C代谢通量分析(MFA)方法,发现同位素非稳态MFA在培养的P493-6 B细胞中实现了最大通量分辨率,这些细胞已被设计用于提供Myc癌蛋白的可调表达。在致癌(高)和内源性(低)Myc表达水平下获得的代谢通量图的比较表明,异位Myc表达导致了网络范围的重编程。高Myc细胞比低Myc细胞更依赖线粒体氧化代谢,全球范围内上调了其相对于葡萄糖的氨基酸消耗。与葡萄糖摄取和乳酸排泄的适度增加相比,TCA循环和角代谢线粒体途径在High Myc细胞中的通量增加了2-4倍。由于我们的MFA方法完全依赖于蛋白质结合氨基酸和RNA结合核糖的同位素测量,因此它很容易适用于更复杂的肿瘤模型,这些模型不适合直接提取和对游离细胞内代谢物进行同位素分析。
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