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.2012年8月;42(8):806-18.
doi:10.1111/j.1872-034X.2012.00883.x。 Epub 2012年3月13日。

Ca(2+)/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II介导转化生长因子-β诱导的肝星状细胞增殖,但不参与胶原α1(I)的生成

附属公司

Ca(2+)/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II介导转化生长因子-β诱导的肝星状细胞增殖,但不参与胶原α1(I)的生成

平安保险等。 肝素研究. 2012年8月.

摘要

目标:肝星状细胞(HSC)是肝纤维化的主要参与者。转化生长因子-β(TGF-β)作为一种最有效的有丝分裂原,强烈激活HSC并增加细胞内Ca(2+)浓度。在这里,我们评估了Ca(2+)/钙调蛋白依赖性蛋白激酶II(CaMKII)的潜在作用,Ca(2+)信号在肝纤维化级联中的主要下游效应器。

方法:本研究使用人类永生HSC细胞系LX-2和原代大鼠肝星状细胞。分别用KN-93/CaMKIIαsiRNA和LY294002阻断CaMKII和抑制Akt。采用5-溴脱氧尿苷掺入法检测HSC增殖。采用实时聚合酶链反应、western blot和酶联免疫吸附试验分别检测培养基中的mRNA、细胞蛋白和蛋白质。免疫细胞化学检测前胶原α1(I)的表达。通过(CAGA)(12)-MLP荧光素酶活性测定测定CaMKII对TGF-β/Smad诱导的胶原α1(I)表达的作用。

结果:TGF-β显著增加CaMKII mRNA,以及CaMKIL的总表达和磷酸化表达。KN-93和CaMKIIαsiRNA抑制TGF-β介导的HSC增殖。CaMKII阻断TGF-β诱导的Akt激活。LY294002抑制HSC增殖和胶原α1(I)的产生,但对CaMKII没有影响。此外,CaMKII导致p21和p27表达增加。KN-93和CaMKIIαsiRNA抑制TGF-β诱导的和基底胶原α1(I)的生成,但对TGF-α刺激引起的(CAGA)(12)-MLP荧光素酶活性没有影响。

结论:CaMKII是TGF-β诱导的成纤维级联反应中的关键信号,通过刺激HSC增殖,参与基础胶原的生成。因此,CaMKII将成为发展治疗性干预策略以减轻肝纤维化的潜在有效靶点。

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